人类神经母细胞瘤骨侵袭模型的建立及PTHLH蛋白在其中的表达.pdfVIP

·中文论著摘要· 人类神经母细胞瘤骨侵袭模型的建立及PTHLH蛋白 在其中的表达 是婴儿时期诊断的最常见的新生肿物Ⅲ。NB占15岁以下恶性肿瘤病例的6—10％， 占所有儿科肿瘤死亡病例的15％眨3。探讨如何建立适合长期研究与治疗的人类神经 母细胞瘤(NB)骨侵袭的动物模型以及骨侵袭相关因子PTHLH蛋白在其中的表 达，对临床研究NB的侵袭相关有重要的指导意义。 方法：收集10代以内处于对数生长期SH．SY5Y肿瘤细胞，机械分离制成单 细胞悬液，以无血清培养基重悬细胞，调整细胞密度，然后采用骨髓腔内注射与肌 肉内注射的方法分别种植到无胸腺裸鼠体内。待局部成瘤后，应用外科手术方法 将肿瘤及其周围组织取材，经甲醛固定，脱钙，石蜡包埋，切片等步骤后，采用 免疫组化的方法比较骨髓腔内成瘤和肌肉内成瘤中PTHLH的表达。分别收集 SH．SY5Y细胞及2种成瘤方式的肿瘤组织，充分破碎后，提取其中的蛋白质，应 用Western-Blot的方法检测PTHLH蛋白在其中的表达。 结果： 1、SH-SY5Y细胞系细胞在骨髓内直接种植在全部试验动物中可以侵袭骨质 形成溶骨性病变： 2、SH-SY5Y细胞系细胞肌肉内直接种植在全部试验动物中可以形成肿瘤， 但无法侵袭骨质形成融骨性改变。 3、免疫组化结果显示所成的肿瘤中均有PTHLH蛋白的表达，定位于胞浆。 在骨髓内成瘤的组织内表达量较多。 次之，细胞系内含量最低。 结论：SH-SY5Y细胞系细胞在骨髓内和肌肉内均可以成瘤，PTHLH蛋白可能 与骨侵袭的过程相关。 关键词：神经母细胞瘤，SH—SYSY，骨侵袭模型，PTHLH 2 ·英文论著摘要· Establishmentofboneinvasionmodelfor human Neuroblastomaand ofPTHLH expression themostcommontumorinextracranial objective：Neuroblastoma(NB)is solid tumorsofchildrenand themostinInfant causesabout6—10 diagnosed period。NB ofallcancersFifteen percent under oldandaccountsfor15 ofchildhood years percent cancerdeaths．ToestablishboneinvasionanimalmodelofNB anddetectthe ofPTHLHhave for researchandtreatment expression importantsignificancelong-term ofNB． Methods：Collectthe10tll SH．SY5Ytumorcellsinthe generation logarithmic into cell serumfree single phase,mechanicallyseparated suspensionculture，use mediumto