微生物生长繁殖的测定方法.docVIP

微生物生长繁殖的测定方法 1. 内容 1.计数法：通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量。 （1）直接计数：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。缺点：不分死活菌。 （2）间接计数（活菌计数法）：其原理是每个活细胞在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。 2.重量法：以细胞的生长量作为细菌生长测定的指标。 （1）湿重法：将一定体积的样品通过离心或过滤将菌体分离出来，经洗涤，再离心后直接称重，求出湿重，如果是丝状体微生物，过滤后用滤纸吸去菌丝之间的自由水，再称重求出湿重。 （2）干重法：不论是细菌样品还是丝状菌样品，可以将它们放在已知重量的平皿或烧杯内，于105℃烘干至恒重，取出放入干燥器内冷却，再称量，求出微生物干重。 3.生理指标法： （1）含氮测定法：一般微生物细胞的含量比较稳定，故可用凯氏定氮法等测其总氮量，再乘以系数6.25即为粗蛋白含量。蛋白含量越高，说明菌体数和细胞物质量越高。 （2）DNA含量测定法：微生物细胞的DNA含量较稳定，故可采用适当的荧光指示剂或染色剂与菌体DNA作用，荧光比色或分光光度法测得DNA含量。 2. 练习 一、选择 1. 测微生物活菌数通常采用：（ ） A.稀释平板法 B.滤膜培养法 C.稀释培养法 答案：A 二、简答 1.试述涂片计数的基本方法。 答案：取载玻片一块，用蜡笔在中央画出一平方厘米的面积。将待测样品稀释到一定浓度后取0.01毫升菌液滴在载玻片上的一平方厘米面积上。然后在显微镜下计数每个视野的菌数（至少数10个视野，计算平均菌数）。将视野的面积算出来后，按下列公式计算样品中的含菌数。 每克样品中的含菌数＝----------(每个视野的平均菌数(100(稀释倍数 3. 测验 一、填空 1.一般细菌的干重约为湿重的______%。 二、简答 1.简述平板菌落测试法。 4. 案例 5. 资源下载 课程讲义资源（Word文档）、教学课件资源（PPT）、视频录像资源（视频录像）。 6. 扩展学习 使用教材： 微生物学教程 第3版 周德庆主编 高等教育出版社 2011 参考书目： 1.沈萍主编，《微生物学》，高等教育出版社，2000； 2.沈萍、范秀容、李广武编，《微生物学实验》第3版，高等教育出版社，1999； 3.Prescott LM, Harley JP, and Klein DA. Microbiology (5th ed.), Higher education press and McGraw-Hill Companies, 2002. 4. 闵航（2005）：微生物学. 浙江大学出版社 参考期刊： 微生物学报 中国科学院微生物研究所；中国微生物学会主办 微生物学通报 中国微生物学会中国科学院微生物研究所主办/sdinfo 中国微生物信息网络 / 1cm2 视野面积