L-半胱氨酸作为化妆品美白添加剂的作用机理.pdfVIP

第 48卷 第 4期 厦 门大学学报 (自然科 学版) VO1．48 No．4 2009年 7月 Journa】ofXiamenUniversity(Natura1Science) Ju1．2OO9 L一半胱氨酸作为化妆品美 白添加剂的作用机理 杨美花 ，李智聪 ，刘凤娇 ，庄江兴，王 勤，陈清西 (厦门大学 生命科学学院，细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室，福建 厦门 36l0o5) 摘要 ：酪氨酸酶 (Ec1．14．18．1)是黑色素形成的关键酶，其抑制剂的研究是当前美白添加剂研究的热点．研究了L·半胱 氨酸(L—Cys)对蘑菇酪氨酸酶和小 鼠B16黑色素瘤细胞粗提 的酪氨酸酶的抑制效应 ，实验结果表 明．L-Cys对 2种来源 的酪氨酸酶有较强的抑制作用，其半效抑制浓度分别为 1．75，15 mol／L．对小鼠B16黑色素瘤细胞粗提 的酪氨酸酶的 抑制主要表现为显著延长酶促反应的迟滞时间，同时显著降低酶的活力．进一步对 L—Cys在细胞毒性方面进行了研究， 结果表明，在 200 mol／L浓度下，L—Cys对小 鼠黑素瘤细胞 B16的生长未显示 出明显影响，对细胞状态、代谢 MTT的能 力、细胞增殖率等均无影响，无明显细胞毒性，是一种有潜力的增 白剂，为L—Cys作为美 白添加剂提供了依据． 关键词 ：L一半胱氨酸；黑色素；酪氨酸酶；B16黑色素瘤细胞 中图分类号 ：Q356．1 文献标识码 ：A 文章编号 ：o438一o479(20o9)o4．o581一o4 黑色素是在黑素小体 内合成 的一类具有复杂结 1．1 材 料 构、非均质的类多酚聚合体，其量的多少以及分布决定 小 鼠B16黑色素瘤细胞购 自CTCC；RPMI164O 着肤色的深浅 ，其代谢失调会导致色素沉着性疾病 [1]． 培养基 、胎牛血清购 自Gjbco公司；双抗 (1OoOOU／ 哺乳动物体 内，酪氨酸酶首先催化 L一酪氨酸羟化成为 mL青霉素、10o00 g／mL链霉素)、3一(4，5一二 甲基噻 L多巴(L～DOPA)，并进一步催化 L—DOPA氧化生成 唑一2)一2，5一二苯基 四氮唑溴盐 (MTT)、胰酶 、L—DOPA 多巴醌 ，再经过多步酶促和非酶促反应 ，最终生成黑色 与蘑菇酪氨酸酶均购 自SigmaAIdrich公司；L—Cys购 素．、酪氨酸酶是皮肤黑色素生物合成的关键酶，决定黑 自奥伯生物试剂公司．其余试剂均为国产分析纯． 色素合成的速率 [1]．当前化妆品市场上的美 白产品的 1．2 方 法 主要添加剂如曲酸及其衍生物、熊果甙 、抗坏血酸及其 1．2．1 L-Cys对蘑菇酪氨酸酶催化 L-DoPA氧化反 衍生物、维生素 E、绿茶提取物 、甘草提取物等，均是通 应吸收光谱的影响 过抑制酪氨酸酶的活性从而抑制黑色素合成，达到美 采用文献[6]的测活体系，在含有 O．5mmol／LL— 自的效果[2]．因此，寻找安全、高效的酪氨酸酶抑制 DOPA，3．33 g／mL酪氨酸酶 ，O．O5mol／L磷酸缓冲 剂成为化妆 品添加剂研究的热点． 液 (pH6．8)的反应体系中，加入不 同浓度 的L—Cys， L一半胱氨酸 (L—Cys)是一种含有巯基的天然氨基