甘蓝型油菜成籽粒DNA快速提取方法探讨.pdfVIP

作物杂志 Crops 2012 11 甘蓝型油菜成熟籽粒DNA快速提取方法探讨 谢景梅 刘晓兰 曲存民 卢坤 吕俊 李加纳 ( 西南大学南方山地农业教育部工程技术中心, 400716, 重庆北碚) 以室温保存不同年份的甘蓝型油 推广面积 已达到油菜总生产面积的 50% 以 菜种子为材料, 采用改良的CTAB 法和 DNA 抽提 上[ 2 -3] 。同时, 在种植的转基因作物中, 油菜占 试剂盒分别提取甘蓝型油菜籽粒 DNA, 探讨适合 到约5% [ 4] , 在转基因食品的安全性及对生态环 甘蓝型油菜籽粒 DNA 提取的方法。结果表明, 境的安全性方面还存在诸多问题需要解决。因 不同保存年份种子提取的 DNA 含量无显著差 此, 为确保种子销售之前快速得到正确的鉴定结 异; 受种皮色泽的影响也较小; 用改良的 CTAB 果, 避免不合格种子流入市场, 建立一种作物快 法比试剂盒所提 DNA 产量高, 结构完整性好, 成 速检测的方法具有十分重要的现实意义。分子 本较低。 CR 扩增检测结果表明两种方法获得 标记技术具有信息含量丰富, 检测不受季节、环 的DNA 均能满足一般的分子实验。因此, 油 [ 5] 境影响等优点 , 是目前最先进的遗传标记系 菜干籽粒中直接提取 DNA 可以节约时间, 显著 统。目前用于油菜 DNA 提取的方法有 SDS 法、 提高工作效率, 为快速高效地进行甘蓝型油菜种 CTAB 法、高盐低pH 法和快速试剂盒法。也有人 质资源和遗传多样性分析奠定了基础, 同时, 也 针对油菜基因组 DNA 常规提取方法的不足, 对 利于快速鉴定推广品种是否带有外源基因。 提取程序进行改良[ 6 -9] , 目前用于 DNA 提取的 甘蓝型油菜; 种子; 基因组 DNA; 改 材料多是油菜叶片, 在油菜生长期达到20 ~ 30d 良CTAB 法; 试剂盒 取材效果较好, 但这个过程需要较长的时间, 用 油菜种子进行发芽鉴定一般也需要5 ~ 6d, 这时 油菜( Brass ica nap us L 1) 属十字花科芸薹属, 幼苗较小, 需要的种子量较大, DNA 提取样品损 在世界油料作物中占有重要地位, 是世界四大油 失也较大、提取效率比较低, 且随着储存年份的 料作物( 大豆、向日葵、油菜、花生) 之一, 也是我 [ 1] 延长, 种子的发芽率会降低, 种子的需要量 自然 国最主要的油料作物 。目前, 进一步改良油菜 增加, 因此不利于该方法在种子快速检测中推广 品种的目标就是在优质的基础上, 利用杂种优势 使用。本研究以10 个不同保存年份的甘蓝型油 来充分发掘其增产潜力, 并且在我国杂交油菜的 菜品种的干种子、双蒸水浸泡6h 和 12h 的种子 作者简介: 谢景梅, 硕士, 主要 事油菜育种研究 李加纳为通讯作者, 教授, 研究方向为作物遗传育种