杆状病毒多基因表达系统介导的轮状病毒样颗粒表达与组装.pdfVIP

2010;30(7) 南方医科大学学报(J South Med Univ) 1491 · · 杆状病毒多基因表达系统介导的轮状病毒样颗粒表达与组装 1, 2 2 1 3 1 1 1 2 龙 虎 姚伦广 王姗姗 陈士新 谭佩婵 孙京臣 华南农业大学动物科学学院 广东广州 510642 南 ， ， ， ， ， （ ， ， ； 阳师范学院伏牛山昆虫生物学重点实验室 河南南阳 473061 3 海军广州基地赤沙干休所 广东广州510230 ， ， ； ， ） 摘要 目的 构建能同时表达轮状病毒vp2 vp6 vp7 基因的重组家蚕杆状病毒 并在BmN 细胞中进行初步表达 方法 ： 、 、 ， 。 利用 细胞繁殖人 组轮状病毒 扩增病毒结构蛋白 基因 连接至转移载体 和 MA104 A RT-PCR vp2 vp6 vp7 pFBDM ， 、 、 ， pUCDM 中 同时引入含IE1 启动子的绿色荧光蛋白基因利于检测感染和表达量 再分别通过Tn7 及 Cre-LoxP 重组构 ， ， 建重组病毒 为方便检测基因的表达 在 的 末端添加 组氨酸 标签 可通过 等方法快速检测目 。 ， VP7 C- 6- (6-His) ， ELISA 的基因表达 结果 扩增获得了轮状病毒三个结构蛋白基因 构建了能高效组装轮状病毒样颗粒的重组表达载体 。 ， ， ELISA 检测VP7 得到了表达 在BmN 细胞中观察到病毒样颗粒 结论 成功构建杆状病毒多基因的表达系统 为生产