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第三节显色反应及测定条件的选择.ppt

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第三节 显色反应及测定条件选择 1、影响显色反应的因素 显色反应:对于无色或浅色物质,将试样中被测物质组分转变成有色化合物。 显色剂:与被测组分发生反应生成有色化合物的试剂。 第二章 分光光度计 第三节 显色反应及测量条件选择 1、影响显色反应的因素 显色剂发生显色反应的要求: (1)选择性好:一种显色剂只与一种被测组分显色。 (2)灵敏度高。 (3)有色化合物组成恒定,性质稳定。 (4)若显色剂本身有色,应与生成的有色化合物颜色差别大。 (5)重现性好。 第二章 分光光度计 第三节 显色反应及测量条件选择 1、影响显色反应的因素 显色剂分类: (1)无机显色剂:灵敏度、选择性不高; (2)有机显色剂:颜色鲜明,选择性,灵敏度高,种类多,应用广。 第二章 分光光度计 第三节 显色反应及测量条件选择 1、影响显色反应的因素 影响显色反应因素: (1)用量:总原则遵循显色反应尽量完全,一般需要加入过量显色剂; (2)酸度:显色剂大多数是有机弱酸,酸度变化,显色剂的颜色也会发生变化。 (3)温度:显色反应一般在室温条件下进行,有时需要加热以促进显色反应。 第二章 分光光度计 第三节 显色反应及测量条件选择 1、影响显色反应的因素 影响显色反应因素: (4)显色时间:显色时间即显色反应完成所需时间;稳定时间:显色后物质保持稳定时间。 (5)溶剂:溶剂类型不同,生成的显色物质不同,物质颜色也不同。 第二章 分光光度计 第三节 显色反应及测量条件选择 2、共存离子干扰及消除方法 (1)干扰原因 ①共存离子本身有颜色; ②共存离子与显色剂或被测组分反应,使显色剂和被测组分降低,结果偏低; ③共存离子与显色剂生成有色化合物或沉淀,结果偏高 ; ④虽然生成无色化合物,但大量消耗显色剂,干扰测定。 第二章 分光光度计 第三节 显色反应及测量条件选择 2、共存离子干扰及消除方法 (2)消除方法 ①控制酸度,只使被测离子显色,干扰离子不显色; ②加入掩蔽剂(注意使用的掩蔽剂的pH值); ③改变干扰离子价态 ; ④选择适当波长:吸光度最大,干扰最小。 ⑤选择合适的参比溶液。 ⑥分离干扰离子:电解法、沉淀法、溶剂萃取法、离子交换法分离干扰离子 第二章 分光光度计 第三节 显色反应及测量条件选择 3、测量条件选择 (1)选择合适的测定波长: 利用光谱扫描,兼顾“吸光度最大,干扰最小”的选择,选择物质的最大吸收波长 作为测定波长。 第二章 分光光度计 怎样选择合适波长 通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度(吸光度),以波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范围的吸收曲线,在吸收曲线中,通常选用最大吸收波长 进行物质含量的测定。 第三节 显色反应及测量条件选择 3、测量条件选择 (2)吸光度范围 吸光度应控制在0.2-0.8之间,以保证较高的准确度。 控制方法可采用: ①改变取样量,稀释、改变或控制待测溶液浓度; ②选择不同厚度的吸收池,以调节吸光度A的大小。 第二章 分光光度计 第三节 显色反应及测量条件选择 3、测量条件选择 (3)参比溶液的选择 选择合适的参比溶液调节仪器零点,消除溶剂、试剂对入射光的吸收,造成误差。 溶剂参比:共存组分对测定波长的光无吸收,只是溶剂对测定波长的光有吸收。 试剂参比:显色剂或其它试剂对测定波长的光有吸收,应使用试剂参比,与试样做平行操作,以消除试剂干扰。 第二章 分

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