氮溶指数（TCA-NSI）检测方法.docVIP

氮溶指数（TCA-NSI）检测方法 氮溶指数（TCA-NSI）检测方法在下面，检测的基本原理是：第一步，先用三氯乙酸和离心的方法沉淀出不可溶蛋白，然后再用凯氏定氮法测定溶液中可溶蛋白（即可溶性小肽）占总样品的百分含量C1。第二步，用凯氏定氮测定样品中的总蛋白C2。第三步，用??可溶性蛋白的百分含量C1/总蛋白的百分含量C2 ，得到氮溶指数（TCA-NSI） 附录：氮溶指数（TCA-NSI）检测方法发酵大豆蛋白中小肽的测定1、原理：利用三氯醋酸作蛋白质沉淀剂，将发酵大豆蛋白中的蛋白质和肽链较长的肽沉淀，并将其中的短链小肽用酸溶解出来，经过滤、离心、消化、蒸馏，测定其蛋白质含量，并以其占样品粗蛋白质的百分数来表示含量。本方法是参照中华人民共和国轻工行业标准大豆肽粉标准(QB/ T 2653 -2004)基础上修订而来。2、试剂及仪器：1）100ml烧杯；2）10ml，50ml移液管；3）干过滤装置；4）半微量法或全量法粗蛋白质测定的试剂和装置；5）15％三氯醋酸溶液；6）4000 转/ 分钟的离心机。3、方法：准确称取样品6克于100 ml烧杯中,准确加入15 %三氯乙酸溶液50 毫升，混合均匀，静置5 分钟，以中速定性滤纸干过滤，弃去少许初始滤液，将滤液转移至离心管，在4000 转/ 分钟下离心10 分钟，准确移取其上清液10ml于消化管中，按半微量法（消化后定容至100ml，准确移取其中10ml进行蒸馏）或全量法粗蛋白质测定方法测定其粗蛋白质含量。同时做空白试验、测定样品的粗蛋白质的含量。4、结果与计算：小 肽%（半微量法）=（V1－V0）×C×6.25×0.014×10×5÷m×100%÷cp×100%小 肽%（全量法）=（V1－V0）×C×6.25×0.014×5÷m×100%÷cp×100%? ?? ?? ?? ?式中： V1--馏出液消耗盐酸标准液的体积，ml；V0--空白试验消耗盐酸标准液的体积，ml；C--盐酸的摩尔浓度，mol/l；6．25×0．014--蛋白质转换系数；m--称取样品质量，ｇ；cp—样品的粗蛋白质含量，%。重复性:? ?A）、每个试样的两个平行样间允许相对偏差为其算术平均值的10%，以其算术平均值上报结果；? ?? ?? ?? ???C）、所得的结果是指小肽占粗蛋白质的百分含量。因其中含有无机氮，测得结果应减去无机氮，见非蛋白氮的测定。