生物制药 第五章 抗体工程制药.ppt

2010年8月生物制药 温州医学院 生命科学学院 王慧利 内容 第一章绪论 第二章 生物药物概论 第三章 生物制药工艺学 第四章 基因工程制药 第五章?抗体工程制药 第六章 动物细胞制药 第七章 植物细胞制药 第八章 酶工程制药 第九章 海洋生物制药 第十章 利用现代生物技术改造传统制药工业 第五章 抗体工程制药 第一节 概论： 1 抗体概念 2 抗体产生细胞学基础 3 抗体特性 4 抗体结构及多样性 5 抗体形成的研究历史 第二节 抗体工程 1 多克隆抗体 2 单克隆抗体 3 基因工程抗体 4 抗体库 5 应用： 抗体诊断试剂的研究 抗体治疗药物的研究 （1）抗体基本概念?? 免疫反应 免疫系统与免疫细胞 免疫分子（抗体，补体，细胞因子等） 免疫细胞 ：(淋巴细胞、粒细胞 及白细胞、浆细胞、肥大细胞等) 免疫器官：中枢免疫器官和周围免疫器 官 ； A\中枢器官是免疫细胞发生和分化的场所(胸腺--T、骨髓—成血干细胞和鸟类法氏囊---B) B\周围免疫器官是免疫细胞居住和发生场所:淋巴结、脾脏、黏膜相关的淋巴组织----分布于呼吸道、消化道\泌尿系统黏膜 免疫系统与免疫细胞 B细胞 巨噬细胞的吞噬作用 3、免疫因子：主要包括膜表面免疫因子和体液免疫因子。 B和T细胞表面有各自的特异性膜表面抗原受体BCR和TCR,能识别特异性抗原并与之结合，启动特异性免疫。 体液免疫因子主要包括抗体、补体和细胞因子。细胞因子是免疫细胞分泌的低分子的多肽，包括白细胞介素（IL）集落刺激因子（CSF）干扰素（INF）肿瘤坏死因子(TNF)及转化生长因子(TGF),具有多方面调节作用；既有细胞毒素和抗病毒功能，直接参与免疫应答的效应过程 （3）抗体的特性 （1）结合特异性抗原：抗体与其它免疫球蛋白分子最大区别就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应；抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。 （2）激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。 （3）结合细胞：不同类别的免疫应答。 （4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 （5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 （6）抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。 抗体结合抗原的活性 抗体产生的规律 （1）初次反应产生抗体：当抗原第一次进入机体时，需经一定的潜伏期才能产生抗体，且抗体产生的量也不多，在体内维持的时间也较短。 （2）再次反应产生抗体：当相同抗原第二次进入机体后，开始时，由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合，可使原有抗体量略为降低。随后，抗体效价迅速大量增加，可比初次反应产生的多几倍到几十倍，在体内留存的时间亦较长。 （3）回忆反应产生抗体：由抗原刺激机体产生的抗体，经过一定时间后可逐渐消失。此时若再次接触抗原，可使已消失的抗体快速上升。若再次刺激机体的抗原与初次相同，则称为特异性回忆反应；若与初次反应不同，则称为非特异性回忆反应。非特异性回忆反应引起的抗体的上升是暂时性的，短时间内即很快下降。 （4）抗体的基本结构和多样性 基因多样性决定抗体多样性 ●免疫球蛋白反应的特异性和分子的多样性是受基因支配；一条肽链的C区和V区分别由C基因和V基因编码。任何一个B细胞都有3个独立的Ig基因簇： 1个H链基因簇： 2个L链基因簇：κ和λ 共同构成Ig的结构基因 ●在B细胞分化成熟过程中进行基因重排，进而转录与翻译，形成抗体。  (5）抗体的分类 （1）按作用对象，可将其分为抗毒素、抗菌抗体、抗病素抗体和亲细胞抗体（能与细胞结合的免疫球蛋白，如1型变态反应中的lgE反应素抗体，能吸附在靶细胞膜上）。 （2）按理化性质和生物学功能，可将其分为IgG、IgA、IgM、IgE、IgD五类。 抗体的分类 5大类： IgG-----是成人血清中的主要成分