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抑制PI3K-PKB信号通路提高胃癌细胞化疗敏感性的研究.pdf
Bulletin2008
中国药理学通报ChinesePharmacological Dec；24(12)：1666～70
抑制P13K／PKB信号通路提高胃癌细胞化疗敏感性的研究
谢霞，高青，王艳丽，田狮
(重庆医科大学附属第一医院消化内科，重庆400016)
735．205．3
中图分类号：R329．25；R345．57；R735．202．2；R 胞对化疗药物的敏感性[3’41；细胞凋亡受抑制又是
文献标识码：A文章编号：1001—1978(2008)12—1666-05
MDR产生的另一重要原因，肿瘤细胞对化疗药诱导
3-
摘要：目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol
的凋亡敏感性，取决于促凋亡和抗凋亡信号通路之
kinase，P13K)抑制剂LY294002提高胃癌耐药细胞SGC7901／
间的平衡关系，P13K／PKB级联信号途径已被认为
VCR和亲代细胞SGC7901对化疗药物敏感性的作用及其机
是肿瘤细胞抗凋亡的主要机制之一。此途径可以通
制。方法 M1Tr法分别检测胃癌细胞SGC7901和
过促进细胞凋亡增加肿瘤细胞对化疗药的敏感
SGC7901／VCR对化疗药长春新碱(VCR)的敏感性；RT—PCR
性旧】，因此通过抑制蛋白激酶信号途径提高肿瘤化
法和免疫细胞化学法检测LY294002处理前后多药耐药蛋白
resistance 疗敏感性是目前研究的热点。
1(muhidrugprotein-1，MDRI)和x染色体连锁的凋
inhibitorof
亡抑制蛋白(X-linked apoptosis，XIAP)基凶和蛋
白水平；Westernblot法检测I,Y294002处理前后细胞PKB总
蛋白水平和磷酸化水平；并用流式细胞仪检测细胞的凋亡 性的影响，初步探讨其分子机制，为寻求新的高效低
2×10～mol·L。1
率。结果 LY294002能明显增加
毒胃癌化疗方案提供理论依据。
SGC7901和SGC7901／VCR细胞对VCR的敏感性(P
1材料与方法
0．01)，其IC50分另U由(0．20±0．03)和(8．09±0．60)mg·-
1．1材料
L“降至(0．05±0．006)和(1．70±0．20)mg·L～；降低细胞 1
1．一1．1 细胞SGC790
1购于中科院上海细胞所，
MDRl和XIAP的基因和蛋白水平；降低磷酸化PKB水平，
而对其总蛋白水平无影响；IX294002联合VCR用药后细胞
士惠赠。 一
凋亡率明显高于单独VCR处理(P0．01)。结论
1．1．2主要试剂和仪器RPMI
LY294002通过降低耐药基因MDRI和抗凋亡基因XIAP的 1640培养基购自
表达，提高耐药和非耐药胃癌细胞对化疗药物的敏感性，此 美国Gi
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