川芎嗪对烫伤的实验研究.docVIP

川芎嗪针对烫伤的实验研究 张东 （陕西理工学院，生物科学与工程学院，生工091班，陕西，汉中，723000） 指导老师：陈曦 ［摘要］目的：探讨川芎嗪对烧伤早期血管内皮细胞的保护作用。方法：用豚鼠30%TBSA度烫伤为模型，分为复苏组(n=48)、治疗组(n=48)和伤前对照(n=8)。复苏组在烧伤后立即给予平衡液复苏，治疗组在复苏同时给予川芎嗪。分别在伤前、伤后2、4、8、12、24和48小时，测定血浆内皮素(ET)、一氧化氮(NO)；在伤后4和8小时取回结肠动脉中段作透射电镜观察。结果：治疗组各时相点ET水平较复苏组低(P＜0.05，P＜0.01)，NO水平无显著性差异，两组ET/NO比值比较，有显著性差异(P＜0.05)。病理显示，治疗组血管内皮细胞损害明显轻于复苏组。结论：川芎嗪对烧伤早期血管内皮细胞有保护作用。关键词] 川芎嗪；血管内皮细胞；内皮素；一氧化氮严重烧伤早期，血管内皮细胞(VEC)受激或损伤是导致血管通透性增高，引发低血容量性及脏器功能损害的重要病理基础。川芎嗪具有改善微循环、抗血小板凝集、防止血液粘稠度升高的作用。为此，我们采用豚鼠30%TBSA度烫伤为模型，在体液复苏同时，应用川芎嗪，通过对回结肠动脉内皮细胞的病理观察，结合血浆中内皮素(ET)、一氧化氮(NO)和ET/NO比值的变化，初步探讨川芎嗪在烧伤早期对血管内皮细胞的保护作用。材料与方法 动物模型与分组 英国种豚鼠104只，雌雄各半，体重300±25g(安徽医科大学实验动物中心提供)。随机分为复苏组(n=48)、治疗组(n=48)和伤前对照(n=8)。用戊巴比妥钠15mg/kg腹腔内注射麻醉，背部去毛，置于100水浴锅内烫伤12秒，造成背部30%TBSA度烫伤(病理切片证实)。伤后立即按Parkland公式腹腔注射平衡盐溶液，治疗组在复苏同时，腹腔注射盐酸川芎嗪10mg/kg(常州福民制药有限公司，批号960628)。致伤后单笼饲养。伤前对照只进行同样操作，但不烫伤。 观察指标及方法 血浆ET的测定：分别在伤前、伤后2、4、8、12、24和48小时各活杀8只，经下腔静脉取血2ml，置含10%EDTA 30μl和抑肽酶40μl的试管中混匀，低温离心分离血浆，放免测定血浆中ET浓度(试剂由解放军总医院放免研究所提供)。 血浆NO水平：在采集ET标本同时，取静脉血2ml，立即放入试管中，低温离心分离血浆，重氮化反应测定NO浓度［4］(试剂由安徽医科大学临床药理研究所提供)。 透射电镜观察：在伤后4、8小时取回结肠动脉中段5cm，用3%戊二醛固定，常规漂洗，经锇酸后固定，常规包埋，超薄切片，铅复染后用透射电镜观察(日立7—000型透射电镜)。 统计学处理 各项数据采用+s表示，应用SAS统计软件包进行t检验。 结果 血浆ET水平变化(表1) 伤后复苏组、治疗组ET水平立即增高，8h达峰值，随后虽降低但仍明显高于伤前对照。治疗组各时相点ET值低于复苏组，在2、4、8、12h差异显著(P＜0.05，P＜0.01)。血浆NO浓度变化(表2) 两组伤后各时相点血浆NO水平较伤前增高，峰值在伤后8h，其中在8、12、24h与对照组比较，差异显著(P＜0.05)；治疗组各时相点NO水平较复苏组低，但两组相比，差异不显著。 表1　两组血浆ET水平变化比较(±s) 组别 n ET(pg/ml) 伤前　　伤后 2h 4h 8h 12h 24h 48h 复苏组 48 　 125.65 145.55 182.7 164.95 146.84 130.76 ±14.24△△ ±15.22△ ±21.7△ ±25.1△△ ±16.24 ±17.47 治疗组 48 　 107.55 129.2 152.66 145.47 137.39 121.93 　 　 　 ±12.99 ±11.88 ±16.42 ±18.51 ±19.88 ±12.58 对照组 8 68.9±16.57 　注：与对照组比较，＜0.01；与治疗组同期比较，ΔP＜0.05,ΔΔP＜0.01. 表2　两组血浆NO水平变化比较(±s) 组别 n NO(μmol/ml) 伤前　　伤后 2h 4h 8h 12h 24h 48h 复苏组 48 　 2.878 3.215 3.679 3.433 2.935 2.945 　 　 　 ±1.295 ±1.456 ±1.396 ±0.927 ±0.996 ±0.894 治疗组 48 　 2.785 2.949 3.413 3.391 3.246 2.783 　 　 　 ±1.063 ±1.041 ±1.38 ±0.987 0.974 ±1.036 对照组 8 2.502±0.683