化妆品中二苯酮-2的检测方法.doc

附件5： 化妆品中二苯酮-2的检测方法 1 适用范围 本方法规定了采用高效液相色谱紫外法测定化妆品中二苯酮-2（CAS ：131-55-5）的方法。 本方法适用于膏霜、乳、液、指甲油等化妆品中二苯酮-2含量的测定。暂无实验数据支持本方法适用于粉类、蜡质类化妆品。 2 方法提要 样品经过提取后，经高效液相色谱分离，紫外检测器测定，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法对二苯酮-2的检出限为1.5μg，定量下限为5μg；若取0.1g样品测定，二苯酮-2的检出浓度为0.03%，最低定量浓度为0.1%。 3 试剂和材料 3.1 乙腈，色谱纯。 3.2 超纯水。 3.3 二苯酮-2，纯度≥ 97%。 3.4 二苯酮-2标准储备液：准确称取二苯酮-2 0.1g（准确至0.0001g），置100mL棕色量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为1000μg/mL的标准储备液（1），取5mL，置50mL棕色量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，得100μg/mL的标准储备液（2）。 3.5 二苯酮-2系列浓度标准工作溶液：用乙腈将上述储备液（3.4）按下表配制二苯酮-2浓度为1 μg/mL、2 μg/mL、 4 μg/mL、8 μg/mL、20 μg/mL、100 μg/mL、150 μg/mL的系列浓度标准工作溶液。 序号 储备液 浓度 μg/mL 量取体积 mL 定容体积 mL 标准溶液浓度 μg/mL 1 储备液1 1000 7.5 50 150 2 储备液1 1000 5.0 50 100 3 储备液1 1000 1.0 50 20 4 储备液2 100 8.0 100 8 5 储备液2 100 4.0 100 4 6 储备液2 100 2.0 100 2 7 储备液2 100 1.0 100 1 4 仪器 4.1 高效液相色谱仪：具二元梯度泵，紫外检测器。 4.2 分析天平：感量0.0001g。 4.3 高速离心机。 4.4 超声波清洗仪。 5 测定步骤 5.1 样品处理 准确称取样品约0.1g，精确至0.0001g，置于50mL具塞比色管中，加乙腈：水（90：10）约45mL，超声（功率：500W）处理30min；冷却至室温，用乙腈：水（90：10）加至刻度，摇匀，4500rpm离心30min。取上清液作为待测溶液。 5.2 色谱条件 色谱柱：C18, 250mm×4.6 mm，5μm； 检测波长：335nm； 流速：1mL/min； 柱温：30℃。 流动相：梯度程序见下表： 流动相的梯度程序 时间（min） 乙腈（%） 水（%） 0.00 3.00 13.00 29.00 38.00 40 40 100 100 40 60 60 0 0 60 进样体积：10μL 5.3 测定 在5.2色谱条件下，取系列浓度标准工作溶液（3.5）、待测溶液（5.1）分别进样，进行液相色谱分析，以二苯酮-2浓度（ρ，μg/mL）为横坐标，二苯酮-2峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，得到回归方程。利用回归方程计算出待测溶液中二苯酮-2的质量浓度（ρ，μg/mL），按“6 计算”，计算样品中二苯酮-2的含量。 5.4 平行实验 按以上步骤操作，对同一样品独立进行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 6 计算 ω（二苯酮） = ×100% 二苯酮-2标准溶液（100mg/L）的高效液相色谱图 色谱峰：二苯酮-2（TR=6.3min） ρ×V m(1000