罗丹明B必威体育精装版检测方法.doc

罗丹明B必威体育精装版检测方法 下载 ? 罗丹明B检测套装： 固相萃取柱：HiCapt罗丹明B专用柱(500mg/6mL，订货号：25-05006) 液相色谱柱：Hisep C18-T? 150 mm×4.6 mm i.d., 5 μm（订货号：0246150） 罗丹明B又称玫瑰红B,是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。曾经用作食品添加剂，但后来实验证明罗丹明B会致癌，现在已不允许用作食品染色。然而, 仍有不少食品生产企业将其作为食用色素。因此，建立快速可靠的检测方法非常重要。 维泰克科技成功开发了罗丹明B专用SPE柱，建立了罗丹明B的快速检测方法和实验室液相色谱检测方法，该方法快速、简单、溶剂用量少，回收率稳定重现，克服了传统方法中氧化铝固相萃取柱活性不易控制，方法回收率难以保证等缺陷。 ? 方法的优势： 专利创新的罗丹明B专用萃取填料，有效去除食品中的天然色素和植物油等杂质干扰 回收率稳定、重现，克服了传统方法中氧化铝活性不稳定的缺陷 方法简单、快速、节省溶剂 现场快速检测 1. 样品提取： 1.1 ?辣椒粉? 取辣椒粉一小勺（约1g）放入10mL离心管中，加入6mL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v）），涡混1分钟，静置，待上层液较为清澈，取上清液3mL，准备过SPE柱。 1.2 ?辣椒油?取辣椒油一小勺（约0.5g）放入5 mL离心管中，加入3mL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v）），涡混1分钟，准备过SPE柱。 2. 过固相萃取（SPE）柱：HiCapt 罗丹明B专用SPE柱（500mg/6mL） 将1.1或1.2中准备的样品慢慢倒入小柱中，然后取3mL甲醇慢慢倒入小柱，含罗丹明B的样品在柱上部会出现红色条带，在紫外灯照射下为颜色明亮的桃红色荧光色带，条带边缘清晰，粉红色随含量的增加而加深和加宽，不含或者含量极低（低于0.1μg/g，罗丹明B的着色下限）的罗丹明B的样品，提取液不会出现粉红色条带。 发现罗丹明B的阳性样品需进行液相色谱实验确证。 ? 液相色谱检测方法 1 实验部分 1.1 液相色谱条件 色谱柱：HiSep C18 （4.6mm X 15cm，5μm） 流动相：甲醇/20 mM甲酸铵溶液(用甲酸调pH 2.5)=7/3(v/v) 流速：1 mL/min????????????????????????? ?进样量：20 μL 检测器: 紫外UV/VIS）检测器?????????????检测器波长：550nm 1.2 标准溶液的配制 称取50 mg 罗丹明B于50 mL棕色容量瓶，用甲醇定容，即为1 mg/mL。接着取母液500 μL于50mL棕色容量瓶，用提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v））稀释到50 mL，即为10 μg/mL，作为储备液于4 ℃避光保存，且每周重新配制。每天所用的溶液是将储备液稀释为0.2-5 μg/mL。 1.3 样品前处理 1.3.1样品提取： 1.3.1.1 辣椒粉? 取辣椒粉1.0 g，放入10 mL离心管中，加入6mL的提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v）），涡混1分钟，超声10分钟，接着10000 r/min离心5分钟，取上清液3 mL，准备过SPE柱。 ?1.3.1.2 辣椒油? 取辣椒油0.5 g，放入5mL离心管中，加入3mL的提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v）），涡混1分钟，准备过SPE柱。 1.3.1.3 腊肠、果脯等食品将食品切成小丁，再称取1.0 g, 放入10 mL离心管中，然后步骤同2.3.1.1。 1.3.2固相萃取柱净化：HiCapt罗丹明B专用柱(500mg/6mL) （1）活化：在HiCapt罗丹明B专用柱中依次加入2 mL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v））活化。 （2）萃取：将待净化液加入柱中，再用200μL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1））淋洗样品管，一并加入SPE柱中，让其自然地流过萃取柱。流出液弃去。 （3）清洗：待上样液完全流出后，用3 mL甲醇淋洗，淋洗液弃去。 （4）解吸：3 mL 5%氨水的甲醇溶液解吸，用5mL的小样品管收集解吸液。 （5）吹干及定容：解吸液50℃氮气吹干，加入200 μL流动相溶解并定容。 2 结果与讨论 2.1 标准曲线与检出限 将10 μg/mL的罗丹明B储备液用流动相逐级稀释，配制1、0.5、0.2、0.1、0.05μg/mL标准溶液，制作标准曲线。由表1可见，罗丹明B的线性关系良好，相关系数的平方为0.99999。以性噪比的3倍和10倍分别计算检出限（LOD）和定量限(LOQ),分别为16 ng/g和53 ng/g。 表1线性回归方程、LOD及LOQ 分析物 线性范围 线性回归 LOD[ng/g] (S/N=3) LOQ[ng/g] (S/N=10) a