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第一节 葡萄球菌属(Staphylococcus) 三、微 生 物 学 检 验 （一）标本采集 （二）检验程序 （三）检验方法 （四）结果评价和报告 1、金黄色葡萄球菌：无论任何标本中分离到均 应鉴定并报告临床。 2、表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌：从输液导管、人工植入组织中分离到，应视为致病菌。 3、尿培养计数：103-104为阳性菌尿标准。 4、其他凝固酶阴性葡萄球菌：引起感染流行或治疗失败时，应鉴定到种。 5、金黄色葡萄球菌（MRSA)：头孢菌素类抗生素体外药敏试验为敏感时，不应报告，因体内试验已证实MRSA对该类抗生素耐药。 检验程序 一、生物学特性 （一）形态染色 G+球菌，单个、成双或短链状排列。无荚膜、芽胞，部分菌株有鞭毛。 第三节 肠球菌属 是肠道中的正常菌群 导致医院内感染：如尿路感染、腹部和 盆腔感染、败血症、脑膜炎。 营养要求较高。能在高盐（6.5%NaCl）、高碱（PH9.6）、高胆汁（40%）、10~45℃生长。 菌落：圆形、中等大小、灰白色、不透明、S型，有γ或α溶血。 （二）培养特性 能分解多种糖类 触酶（-） PYR（吡咯烷酮-β-萘基酰胺）试验（+） （三）生化反应 目前分18种。引起医院内感染常见的是粪肠球菌和屎肠球菌。 常用的分型方法：rRNA基因探针分型法。 （四）分型 （五）抵抗力 对理化因素抵抗力弱。 但对大多数抗生素天然耐药。 二、微生物学检验 （一）标本采集 尿液、血液、脑脊液、脓汁分泌物等。 （二）检验程序 尿液、脓汁、穿刺液 血 液 涂片染色 分离培养（血平板、5%CO2） 初 报 挑选可疑菌落 增菌培养（葡萄糖肉汤、5%CO2） PYR试验 胆汁七叶苷试验 6.5%NaCl生长试验 血清学试验 其他鉴定试验 报 告 （三）检验方法 1、直接镜检 适用于：痰、脓、脑脊液、穿刺液标本。 2、分离培养 血平板：灰白色，圆形，中等大小，不透明，S型菌落，周围有α溶血或γ溶血。 选择培养基：叠氮胆汁七叶苷琼脂平板。 3、鉴定试验 （1）菌属鉴定试验： ①PYR试验：肠球菌、A群链球菌、某些凝固酶阴性葡萄球菌为（+） ②胆汁七叶苷试验：+ ③ 盐耐受试验：+ （4）种间鉴定试验：P175表17-3 第四节 奈瑟菌属(Neisseria) 特点：为一群G-双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛，需氧，氧化酶及触酶 +。 种类：共九种，主要致病菌是 脑膜炎奈瑟菌(merningococcus) 淋病奈瑟菌(gonorrhoeae) 一、脑膜炎奈瑟菌 (N.meningitidis) 即脑膜炎球菌， 是流行性脑脊髓膜炎的病原体 （一）生物学性状 1．形态结构 2．培养特性 3．生化反应 4. 抗原结构 5. 抵抗力特点 （一）形态结构 G-，肾形成双排列 在患者脑脊液标本中位于中性粒细胞内 无芽胞、无鞭毛，具有荚膜、菌毛。 2．培养特性 营养要求高，必须在含有血清或多种氨基酸、无机盐的培养基上生长良好。 血平板：半透明，灰褐色，圆形，湿润光滑露滴样菌落。 易自溶。 巧克力平板：圆形，扁平，蓝灰色，半透明，光滑湿润的菌落。 卵黄双抗（EPV）平板：较大，无色，光滑湿润，扁平，边缘整齐的菌落。 血清肉汤：呈微混浊。 3.生化反应 分解葡萄糖、麦芽糖：+ 硝酸盐还原试验阴性，不分解尿素 氧化酶试验阳性 4.抗原结构 可分9个血清群，对人致病的主要是A群 5．抵抗力特点 对寒冷、光、热力，干燥等十分敏感。室温3h，60 ℃ 5min死亡。 采集标本：注意保温迅速送检。 对磺胺类、青霉素、链霉素均敏感。 （二）致病性与免疫性 1．致病物质：菌毛、荚膜、内毒素 　2．所致疾病：传染源、传播途径 　　　寄生在正常人鼻咽部，存在易患人群，与患者补体介导的杀菌活性缺陷有关。约2%-3%的人表现为流脑症状。 3. 免疫性 　 病原可产生群特异性抗体，但不持久。 (三) 微生物学检验 1．标本采集 菌血症期病人采集血液 有出血点或瘀斑者，可取瘀斑渗出液 有脑膜刺激症状，抽取脑脊液 　带菌者：咽拭子 注意事项： 　　立即送检 　注意保温（勿放冰箱） 防干燥 防紫外线 ２、脑膜炎球菌的检验程序 血 液 增菌培养（葡糖肉汤） 分离培养 （巧克力、血平板） 鉴定试验 涂染检 氧化酶 葡、麦糖 多价血清 药敏试验 结果报告 鼻咽拭子 卵黄双抗平板 5~10%