- 1、本文档共24页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
《食品微生物学》实验指导书.doc
《 食品微生物学 》课程
课程编号:419005
实 验 指 导 书
主撰人 曾 智
审核人 陈跃进
单位:生命科学系
二O一二 年 六 月
目 录
前言 1 实验一、 显微镜油浸系物镜的使用与微生物形态观察 3 实验二、 细菌的革兰氏染色 6 实验三、 微生物细胞大小测定和浓度测定 8 实验四、 培养基的制备与灭菌 12 实验五、 环境中微生物的检测 17 实验六、 水中细菌总数检测 20
前 言
实验总体目标 微生物学实验课是一门操作技能较强的课程。通过本课程的学习,要求学生牢固地建立无菌概念,掌握微生物实验的一套基本操作技术;树立严谨、求实的科学态度,提高观察、分析问题和解决问题的能力;树立勤俭节约、爱护公物、相互协作的优良作风。
⒉ 适用专业年级 生物技术专业二年级第一学期
⒊ 实验课时分配 24
实验项目 实验要求 实验类型 每组人数 实验
学时 实验一 显微镜油浸系物镜的使用与微生
物形态观察 必 验证 2 4 实验二 细菌的革兰氏染色 必 验证 2 4 实验三 微生物细胞大小测定和浓度测定 必 综合 2 4 实验四 培养基的制备与灭菌 必 综合 2 4 实验五 环境中微生物的检测 必 验证 2 4 实验六 水中细菌总数检测 必 综合 2 4
实验环境
在微生物学及发酵工程分室中进行,要求至少提供8套可用的仪器设备,分析天平1台,离心机1台,分光光度计1台,恒温水浴3台,高压蒸汽灭菌锅2台,超净工作台3台,恒温摇床2台,恒温培养箱2台,干燥箱1台,冰箱1台。实验室面积60 M2以上,通风、照明设施良好,消防设备齐全,疏散通道正常。
实验总体要求
通过本实验课程的教学,学生能基本上达到独立完成实验内容,通过老师的指导可完成研究性实验内容,能将微生物菌种分离与鉴定、无菌操作等相关知识应用到课程设计、创新性研究、毕业论文等实践性环节中。
本课程的重点、难点及教学方法建议
(1)重点:无菌操作、微生物分离与鉴定等。
(2)难点:严格按照微生物实验操作要求进行各项实验,并理解各注意事项的原因。
(3)教学方法建议:注意理论与实际相结合,重视动手能力的培养和锻炼,对实验结果的可靠性进行对照分析和检测分析。对理论性较强、较为抽象的问题、原理着重讲解,如革兰氏染色法的原理和应用。
实验一 显微镜油浸系物镜的使用与微生物形态观察
实验目的
掌握显微镜低倍镜和高倍镜的使用方法,了解油浸系物镜的基本原理,掌握油浸系物镜的使用方法。
实验主要设备及材料
微生物标本装片,香柏油,二甲苯,光学显微镜,擦镜纸。
实验原理、方法和手段
油镜,即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时,由于空气与玻片的密度不同,使光线受到曲折,发生散射,降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油(其折射率与玻片的相近),则几乎不发生折射,增加了视野的进光量,从而使物象更加清晰。当镜与装片之间的介质为空气时,由于空气(n= 1.52)的折射率不同,光线会发生折射,不仅使进入物镜的光线减少,降低了视野的照明度,而且会减少镜口角。当以香柏油(n=1.515)为介质时,由于它的折射率与玻璃相近,光线经过载玻片后可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射,不仅增加了视野的照明度,更重要的是通过增加数值孔径达到提高分辨率的目的。可见光的波长平均为0.55μm。当使用数值孔径为0.65的高倍镜时,它能辨别两点之间的距离为0.42μm;而使用数值孔径为1.25的油镜时,能辨别两点之间的距离则为0.22μm。
??
?
?
?
?
?
?
光学显微镜的成像原理(倒立的虚像) 介质为空气与介质为香柏油时光线通过的比较
实验内容与步骤
(一)观察前的准备
1、将显微镜置于平稳的实验台上,镜座距实验台边沿约4cm。坐正后用左眼观察。
2、调节光源:将低倍物镜转到工作位置,把光圈完全打开,聚光器升至与载物台相距约1mm左右。转动反光镜采集光源,光线较强的天然光源宜用平面镜,光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜,对光至视野内均匀明亮为止。观察染色装片时,光线宜强;观察末染色装片时,光线不宜太强。
(二)低倍镜观察染色装片
首先上升镜简,将枯草芽孢杆菌染色装片置于载物台上,用标本夹夹住,将观察位置移至物镜正下方,物镜降至距装片0.5cm处,适当缩小光圈然后两眼从目镜观察,转动粗调节器使物镜逐渐上升(或使镜台下降)至发现物像时,改用细调节器调节到物像清楚为止。移动装片,把合适的观察部位移至视野中心。
(三)高倍镜观察
文档评论(0)