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细菌.真菌.pptVIP

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细菌.真菌.ppt

* 细菌 原核生物的一类,无细胞核,只有无核膜包被的拟核。 特点:形状细短,结构简单,多以二分裂方式进行繁殖,分布广,数量多 结构:细胞膜,细胞质,核糖体,一些细菌有荚膜,鞭毛,菌毛等特殊结构 分类:球菌,杆菌,螺旋菌 生活方式:自养和异养 细菌染色 细菌细胞小而透明,普通光学显微镜下不易识别,必须对其进行染色,经染色后菌体与背景形成明显色差,从而更清楚的观察其形态和结构 染料主要分为酸性、碱性和中性 酸性染料例子带负电荷,能与带正电荷物质结合,当细菌分解糖类产生酸而使培养基PH下降时,细菌所带正电荷增加,易被伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料着色 细菌蛋白质等电点低,生长于中性、碱性、弱酸性溶液中常带负电荷,通常采用碱性染料美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等进行染色 中性染料是上述两者结合物,称复合染料,伊红美蓝或伊红天青等 革兰染色法 将所有细胞分为革兰阳性菌和革兰阴性菌 革兰阴性菌细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质,而且肽聚糖层较薄、交联度低、所以用乙醇或丙酮脱色时将类脂质溶解,增加了细胞壁的通透性,使初染的结晶紫和碘的复合液易于渗出,结果细菌被脱色,再经番红复染后呈现红色 细菌 结晶紫 染色1min 洗去染料 碘液 水洗 乙醇脱色 水洗 番茄红 染色4min 水洗 晾干 镜检 注意事项:1图片尽可能均匀,否则将导致脱色不完全引起假阳性      2关键步骤是酒精脱色,如脱色过度,阳性菌也可被脱色而染成阴性菌。如时间过,阴性菌也被=可被染成阳性菌      3整个过程染色液不能干涸。用水冲洗后应吸去玻片上残水,避免稀释染色液      4选幼龄细菌 细菌芽孢和荚膜染色 1芽孢染色(schaeffer和fuiton染色法) 装片 5%孔雀绿 火焰加热 染料冒蒸汽 15-20min 倾去染液 水洗 番红复染5min  水洗、晾干 镜检 结果:芽孢呈绿色,菌体呈红色 荚膜染色(刚果红染色法) 接种环取一环2%刚果红染色液放在玻片中央,无菌操作取菌少许在刚果红染液中涂片(薄而匀),然后滴一滴3%盐酸酒精液,自然晾干后镜检 结果:背景蓝色、菌体浅蓝色、荚膜无色 *

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