细菌的制片与染色2012.pptVIP

实验报告存在问题 实验结果 画图：菌体空心，不规范 实验目的： 1、复习显微镜油镜的使用； 2、掌握细菌制片和单染色方法； 3、了解革兰氏染色法的基本原理和掌握细菌的革兰氏染色法 涂片 干燥 固定 细菌的制片和单染色过程 问题 在细菌制片时是否可以不干燥而直接固定？ 干燥了是否仍然还必须固定？ 涂片 干燥 固定 细菌的制片和单染色过程 染色1~2min 水洗、干燥 镜检 结晶紫 番红 细菌的革兰氏染色 革兰染色法(Gram stain)是细菌学上最经典的、使用最广泛的一种染色方法。由丹麦细菌学家革兰(Christian Gram)于1884年创立。 主要由于细菌细胞壁的结构和组成不同，将绝大多数的细菌分成革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-） 一种复染色的方法 结晶紫初染 碘液媒染 酒精洗脱 复红复染 革兰氏染色的主要过程 肽聚糖 革兰氏染色原理 操作步骤 沙黄或石炭酸复红 1min 结晶紫1min I-KI 1min 95%乙醇脱色5 ～20s 镜检 制 片 水洗、稍干 水洗、稍干 水洗、稍干 水洗、干燥 无色 初染 媒染 脱色 复染 结果 革兰氏染色注意事项 涂片务求均匀，切忌太厚 染料必须覆盖所有涂片区域， 染料不要干枯 脱色时间要把握好 必须选用适龄菌体 设置对照 实验内容 1、对大肠杆菌（ 0.5 μ m × 2 μm ）进行制片和单染色， 用油镜观察其形态 2、对大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌 进行革兰氏染色（混合涂片、单独涂片）， 通过油镜观察染色结果 实验报告 1、图示大肠杆菌显微镜观察结果。 2、用文字说明两种细菌革兰氏染色结果，并进行分析讨论。 3、思考题：影响革兰氏染色结果的因素有哪些？如何保证革兰氏染色结果的可靠性。 * *