结晶紫中性红胆盐MUG琼脂.docVIP

　　编号：022225 　　中文名称：结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG) 　　英文名称：Violet Red Bile Agar-MUG 　　用 途： 　　用于食品中大肠杆菌的平板计数。(GB/T 4789.38-2008) 　　原 理： 蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌，特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;中性红为pH指示剂;琼脂为凝固剂;大肠埃希氏杆菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键，使其水解，释放的4-甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。　　配方(每升)： 　　蛋白胨7g 　　酵母膏粉3g 　　乳糖10g 　　氯化钠 5g 　　3号胆盐 1.5g 　　中性红0.03g 　　结晶紫 0.002g 　　琼脂15g 　　MUG0.1g 　　最终pH 7.4±0.2 　　使用方法： 　　1、 称取本品41.6g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，无需高压灭菌，备用。 　　2、 以无菌手续取样品25g或25mL，加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内，充分振摇或用均质器均质1min成1：10稀释液，然后以1：10继续稀释，选择2～3个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种两个平皿，倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基，琼脂凝固后再加3-4mL培养基覆盖平板表层。 　　3、 36±1℃培养18—24h。 　　4、 微生物检验中观察菌落形态，并于暗室中用360nm～360nm波长紫外灯照射，计数平板上发浅蓝色荧光的菌落。 　　质量控制： 　　质控菌株接种后于36±1℃培养18—24h结果如下： 　　菌 名　　　　　　　　菌 号　　　　生长状况　　　　　　培养特征 　　大肠埃希氏菌　　　ATCC25922　　　　良好　　　　有荧光，深红色菌落，周围有红色沉淀 　　产气肠杆菌　　　　CMCC(B)45103　　 良好　　　　无荧光，红色菌落，周围可有淡红色沉淀 　　粪链球菌　　　　　CMCC32223　　　　受抑制 　　　　　　　　----- 　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。 　　规 格：100g