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铁皮石斛人工栽培与发展前景 摘要:阐述了铁皮石斛的药用价值，比较系统地说明了铁皮石斛的品种选育，它的组织培养技术、设施栽培技术等人工栽培铁皮石斛关键技术和在栽培过程中病虫害防治问题，以及铁皮石斛的发展前景，提出自己的看法以及建议。 关键词:铁皮石斛;品种选育;组织培养;设施栽培;发展前景 铁皮石斛又称黑节草，是我国传统名贵珍稀中药材[1]，喜欢阴凉，常附生在高海拔悬崖峭壁，或林内树干及岩石上。具有益胃生津、滋阴清热等功效[2]，是2005版《中华人民共和国药典》收载的3种石斛属植物之一。由于药用价值高，人为的过度开采与生态破坏，野生铁皮石斛已濒临灭绝，1987年国务院将其列为国家重点保护植物[3]。为了实现铁皮石斛资源可持续利用，国内有关研究机构从20世纪7O年代便开始了铁皮石斛的人工栽培技术研究，但直到21世纪，品种选育、组织培养、设施栽培等人工栽培关键技术才取得突破性进展，并迅速推动产业的发展[4]。 1 品种选育 1.1 种质资源的收集 铁皮石斛主产区及铁皮石斛生产骨干企业都十分重视铁皮石斛种质资源的收集，浙江、广西、云南主产区等省份初步建立了以企业为主体的铁皮石斛种质资源收集、保护与利用体系。各种质之间的形态特征、化学成分、抗病性与抗寒性存在显著差异，基于DNA分子标记的遗传多样性十分丰富。 1.2 引种驯化 在种质资源收集的基础上，进行种质资源的引种驯化[5]与利用。从收集的种质资源中，筛选出具有多糖质量分数高、产量高、适应性强、抗病能力与抗低温能力强等优点的品种，保持它的质量稳定。 1.3 杂交育种 铁皮石斛白花基本不育，长期以来人工杂交一直不理想，自然结实主要依靠昆虫传播授粉，结实率很低。自然结实率低导致资源濒临灭绝；昆虫传播授粉因父本无法控制，导致目前栽培的铁皮石斛品系复杂，品种内致性差，世代之间遗传稳定性差等问题。近年来浙江大学、浙江林学院、等科技人员的人工授粉技术取得了突破，先后培育出一批全同胞F1代，目前正在进行子代测定，初步结果表明杂交后代能够有效地解决铁皮石斛种植过程中高产与优质之间的矛盾。 2 组织培养[6]技术 铁皮石斛人工没施栽培种植密度大，1 公顷需苗木1 50万株，而在自然条件下繁殖率很低，传统的分株、扦插等方式的繁殖率也极低，难以满足规模化生产的需要。利用组织培养技术繁殖试管苗是解决铁皮石斛种苗的有效途径。科技人员先后在外植体类型、培养基、植物生长调节剂、添加剂以及光照、温度、pH等环境条件控制等方面进行了大量研究，并取得了突破，现有设施栽培基地苗木均来自组培工厂。在这工程要注意一下几个问题： 2.1 外植体选择 在植物组织培养中，外植体的选择是十分关键的因素，不同的取材部位和时期，培养的结果也不一样。所以铁皮石斛用茎段作外植体，已成功地诱导出原球茎与无菌丛生芽，并培育出试管苗与再生植株[7]；铁皮石斛的根尖作为外植体也成功诱导出愈伤组织、类原球茎或直接转化成芽获得再生植株，通过细胞学观察认为，铁皮石斛的类原球茎是单细胞起源的体细胞胚；种子在无菌条件下培养，萌芽率显著提高，并诱导出原球茎，培育出试管苗[8]。目前规模化组培生产基地外植体主要是种子。 2.2 培养基改良 用于石斛类的植物组织培养的培养基有MS、KC、N6、B5、SH、1／2B5、1／2N6，1／2SH、1／2MS等【9】，其中MS培养基种子萌发率和丛生芽增殖较其它培养基要高，1／2MS诱导丛生芽效果较好，改良MS培养基(NH4NO3减少50％，其余与MS相同)能显著提高铁皮石斛原球茎增殖倍数【10】。因此，MS、1／2MS和改良MS培养基目前在铁皮石斛组培中使用最多，其中1／2MS培养基用于种子萌发和试管苗生根，MS与改良MS培养基用于原球茎增殖和丛芽促成，B5培养基用于壮苗的培养。 2.3 植物生长调节物质 植物生长调节物质对植物细胞分裂、诱导器官形成和次生产物的合成都具有重要作用，一般高浓度的细胞分裂素有利于诱导芽的发生，低浓度的生长素有利于根的形成。一定浓度范围的生长素和细胞分裂素组合能促进原球茎的形成和芽的分化，IBA对原球茎的分化、试管苗的生根效果良好，0．1mg／L浓度的IBA促进生根效果最佳，6-BA 0．5～1．0 mg／L+NAA 1．0 mg／L+KT 1．0 mg／L激素配比原球茎增殖最佳，6-BA 2．0～3．0 mg／L+NAA O．5～1．0 mg／L+KT 1．0 mg／L激素配比芽的分化较为理想[11]。研究发现，原球茎和丛生芽在添加较高浓度的生长素和细胞分裂素组合的培养中连续继代3～4次，玻璃化现象加剧。 2.4 天然添加物[12] 在铁皮石斛组织培养的过程中，添加各种不同天然附加物(如马铃薯、香蕉汁、苹果汁等)对其生长和发育有一定