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实验九、分离结果检查和微生物大小测定 描述形态特征: P74 各项指标 挑菌落 菌苔长出后,检查特征是否一致,用显微镜检查是否为单一微生物,若发现有杂菌,需要进一步分离、纯化,挑取单个菌落接种到斜面上。 将培养后长出的单菌落分别对应挑取到三种培养基的斜面上。 计数 P94、 P96公式 计算结果 一、目的要求 学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法 增强微生物细胞大小的感性认识 二、基本原理 微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也是分类鉴定的依据之一,其大小的测定需在显微镜下,借助目镜测微尺和镜台测微尺。 镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片,每格长0.01mm,用来校正目镜测微尺每格的相对长度。 目镜测微尺是可放入目镜内的圆形小玻片,中央有精确的等分刻度。由于不同的显微镜或不同的目镜与物镜组合,目镜测微尺每小格所代表的实际长度也会不同。用目镜测微尺测量微生物大小时,必须先用镜台测微尺进行校正,以求出每小格所代表的相对长度。 球菌用直径表示其大小,杆菌用宽和长的范围来表示 三、器材 1.菌种 各组平板上分离的菌株(1-2个即可,菌丝体只测宽度) 2.仪器或其他用具 目镜测微尺 镜台测微尺 载玻片 盖玻片 显微镜 四、操作步骤 1.装目镜测微尺 取出目镜,把目镜上的透镜旋下,将目镜测微尺刻度朝上放在目镜镜筒内的隔板上,然后旋上目镜透镜,再将目镜插入镜筒内。 2.校正目镜测微尺 A. 放镜台测微尺:将镜台测微尺刻度朝上放在载物台上 B. 校正: 先用低倍镜观察,转动目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行,使两尺在某一区域内两线完全重合,分别数出两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占的格数。 用同样的方法换成高倍镜进行校正。 C.计算 目镜测微尺每格长度=两重合线间镜台测微尺格数X10/两重合线间目镜测微尺格数 3.菌体大小的测定 测定时,通过转动目镜测微尺和移动载玻片,测出细菌直径或宽和长所占目镜测微尺的格数,将所测得的格数乘以目镜测微尺每格所代表的长度,即为该菌的实际大小。 4.测定完毕 将目镜测微尺和镜台测微尺分别用擦镜纸擦拭干净,放回盒内保存。 五、实验结果 P48结果部分 * *
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