RT—PCR法在快速检测肠道病毒71型（EV71）核酸中应用.pdfVIP

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2017-08-22 发布于北京
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RT—PCR法在快速检测肠道病毒71型（EV71）核酸中应用.pdf

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维普资讯安徽医学 2008年第 29卷第 4期 363 RT—PCR法在快速检测肠道病毒 71型 (EV71)核酸中应用李国兰郭玲李治悦 1、戈于昌军张威指导杨帆李建国王伟 2008年4月至5月发生在安徽阜阳的手足口病流行其病 PCR引物，肠道病毒通用引物 3一EV／RV／4一EV／RV作第二套原已经确定为肠道病毒 71型 (Enterovirus71，EV71)。EV71属巢式 PCR引物，不分型检测肠道病毒；EV71特异性引物 EV71F 于小RNA病毒科(Picornaradae)肠道病毒属 (Enterovirus)，为一一 2360／EV71R一3150作第一套 RT～PCR引物，EV71F一种单正链 RNA病毒，病毒核酸含有大约 7411个核苷酸。病毒 2643／EV71R一3150作第二套巢式PCR引物；柯萨奇病毒A16 颗粒大致呈球形，无包膜和突起，直径 24～30nm。EV71的流型特异性引物 CA16F一2447／CA16R一3400作第一套 RT— 行多见于夏、秋季，多发生于 10岁以下的儿童。大部分患者恢 PCR引物，CA16F一2447／CA16R一3328作第二套NestedPCR。复良好，但是也有部分患者死于严重的并发症。婴幼儿和免疫扩增产物大小指的是巢式 PCR产物大小。功能低下的成人感染 EV71病毒后易发生严重的并发症 (脑炎，一、病毒核酸的提取类似于d,JL麻痹症候群和肺水肿等)，病死率高，被病毒感染致病毒单正链 RNA基因组的提取按照RneasyMiniKit(QIA— 死的儿童多具有死亡迅速且死亡原因离奇的特点。由于多种 GENCatalog74104)操作说明进行，所提取 RNA贮于一70℃或肠道病毒感染都可导致手足口病并且不同病毒感染所导致手立即进行反转录反应。铝舛舛足口病的疾病过程有所不同，因此及时快速确定手足口病的病 ℃ ℃ ℃ ℃ ℃ ℃ 二、RT一巢式 PCR扩增 cDNA 原体对于疾病的治疗和控制有着至关重要的作用。我们于5 一步法 RT—PCR反应体系配制如下：月6日至 5月 18日采集了95例手足口病患儿及 63例和患儿无 RNA酶水 (RnaseFreeWater) 6．4 密切接触的成年监护人的咽拭子，在中国医学科学院病原生物 2 ×ReactionMix 10p．1 学研究所专家的指导下进行了病毒核酸的RT～PCR法快速诊 PrimerEV71F 一2360 0．3 断。现将结果报告如下：