关于骨质增生的小鼠实验.pptVIP

白马寺消痛贴化瘀消炎作用的实验研究 山东中医药大学 2013-01-30 骨质增生与白马寺消痛贴 骨质增生症又称骨刺、骨关节炎或骨关节退行性病变，属于祖国医学“痹证”的范畴，为中老年人的常见病、多发病，近年来发病率呈上升趋势。其机理除神经根机械性受压外，还与血淤、痰湿等密切相关。扆志德认为骨质增生多由肾虚、痰阻或血淤所致，治疗应重在祛痰通络、活血化淤，兼以补肾软坚。白马寺消痛贴具有消炎、祛风散寒、疏通血脉、祛除血淤之功效，临床可用于治疗颈椎、腰椎骨质增生。且该袪痛膏为软膏剂，可以避免肝脏的“首过效应”和胃肠道的破坏效应，降低药物的毒性和副作用，具有给药方便的优点。为评价该药的治疗作用，本实验从抗炎和活血化淤两方面对白马寺消痛贴进行了以下主要药效学实验研究。 材料、药物与仪器 材料 实验动物 昆明种小鼠，体重（20g±2）g,大鼠，体重(200±20)g，均由山东大学实验动物中心提供，合格证号分别为：鲁动质字、。 药物与试剂 白马寺消痛贴，北京济德汉方国际中医产品研究院研发；阿司匹林肠溶片，山东鲁抗辰欣药业有限公司生产，批号硫化钠，济宁市化工研究所生产，批号：970609；冰醋酸（分析纯），淄博化学试剂厂生产，批号：980715；伊文思蓝，Fluka进口分装，上海化学试剂采购供应站分装，批号：801102；琼脂，广州医药站试剂公司生产，批号：910817；巴豆油致炎液，自配；蛋清，自配。 仪器:GB3031千电子天平，瑞士梅特勒公司制造；T1000 型电子天平，美国双杰兄弟集团有限公司常熟市双杰测试仪器厂制造；DDL-5型低速冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂制造； WJF2100 型可见分光光度仪，外商独资上海合利有限公司制造；FASCO-3010型全自动血流变快测仪，重庆大学维多生物工程研究所生产。 方法与结果 抗炎作用 白马寺消痛贴对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀的影响 小鼠50只，雄性，体重（20±2）g，小鼠颈部、腰部用8%硫化钠饱和溶液脱毛，脱毛面积：颈部约1.2cm*1cm，腰部约2.0cm*1.5cm。次日根据体重将小鼠随机分为正常对照组、阿司匹林组、白马寺消痛贴大、中、小剂量组，共5组。正常对照组在颈部、腰部脱毛区涂抹白马寺消痛贴赋形剂，阿司匹林组0.2g/kg灌胃给药，白马寺消痛贴组5,10,20g/kg在脱毛区涂抹药物后，用纱布、胶布固定。1次/d，连续8d。末次给药后1h，用微量移液器，将2%巴豆油致炎液50位l涂在小鼠左耳前后两面，右耳作空白对照，4h后脱臼处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用9mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片，用电子天平称重，以左耳重=右耳重作为肿胀度。比较给药组和正常对照组肿胀度的差异，并按公式（ 左耳重=右耳重）: 右耳重计算出各给药组抑制肿胀率。 结果说明，白马寺消痛贴能明显对抗巴豆油所致小鼠耳肿胀，经统计学处理，给药组耳廓肿胀度明显低于正常对照组，且药物的肿胀抑制率与剂量成依赖性关系。 白马寺消痛贴对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响 小鼠50只，雌雄各半，体重（20±2）g，小鼠颈部、腰部脱毛，脱毛面积：颈部约1.2cm*1cm，腰部约2cm*1.5cm。次日根据体重将小鼠随机分为正常对照组、阿司匹林组、白马寺消痛贴大、中、小剂量组，共5组。正常对照组在颈部、腰部脱毛区涂抹白马寺消痛贴赋形剂，阿司匹林组按0.2g/kg剂量灌胃给药，白马寺消痛贴5,10,20g/kg组在脱毛区涂抹药物后，用纱布、胶布固定。1次/d，连续8d，末次给药1h后，尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水液0.1ml/10g，立即腹腔注射0.6%醋酸0.2ml/只。20min后脱臼处死小鼠，剪开腹部皮肤，注入生理盐水5ml，轻揉腹部约1min，抽出洗涤液，3000r/min,离心15min，在590nm处测定吸收度（OD值），评价药物对毛细血管通透性的影响。 白马寺消痛贴对蛋清所致大鼠足跖肿胀的影响 wistar大鼠50只，雌雄各半，体重（200±20）g，颈部、腰部用8%硫化钠饱和溶液脱毛，脱毛面积：颈部约3cm*2.5cm，腰部约8.5cm*6.0cm。脱毛24h后根据体重将大鼠随机分为正常对照组，阿司匹林组0.25g/kg，白马寺消痛贴4,8,16g/kg组。阿司匹林组灌胃给药，正常对照组、白马寺消痛贴组分别在颈部、腰部脱毛部位涂抹赋形剂和受试物，并用纱布、胶布固定。1次/d，连续7d，第8天，用玻璃容器法测定每鼠右后肢正常足跖容积，用记号笔在大鼠右后肢踝关节周围做一标记，将大鼠右后肢浸入容器，使标记与液面重叠，多余液体自容器内溢出。取出大鼠后肢，可见玻璃容器中液面下降，其下降容积即为足跖容积。测量正常足跖容积后，各组大鼠给药，药后1