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双甘氨肽分子印迹聚合物微球的吸附性能研究.doc
双甘氨肽分子印迹聚合物微球的吸附性能研究(1)
尹雅楠胡小玲管萍宋任远蒲东
摘要:以双甘氨肽(Gly-Gly)为印迹分子,丙烯酰胺(AM)、二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)分别作为功能单体和交联剂,在低温条件下采用乳液聚 合于水相中制备了双甘氨肽分子印迹聚合物微球(Gly-Gly-MIPMs)。通过静态、动态平衡吸附和薄层色谱(TLC)分离实验,研究了Gly- Gly-MIPMs的选择吸附性能,并进行了Scatchard模型分析。结果表明,Gly-Gly-MIPMs对Gly-Gly分子具有较好的特异性吸 附,最大单位饱和吸附量0.428mmol/g,印迹因子2.19。
关键词:双甘氨肽分子印迹聚合物微球乳液聚合
Study on Adsorption Properties of Glycylglycine Molecular
Imprinted Polymer Microspheres
Yin Ya’nan,Hu Xiaoling,Guan Ping,Song Renyuan,Pu Dong
Abstract Glycylglycine molecular imprinted polymer microspheres were prepared by emulsion polymerization in the aqueous phase at low temperature with Gly-Gly as template,acrylamide as functional monomer and ethylene glycol dimethacrylate as crosslinker.The selective adsorption ability of Gly-Gly-MIPMs was detected by static,dynamic equilibrium adsorption experiments and the TLC separation tests,and the selective binding characteristics were evaluated with Scatchard analysis.The results revealed that Gly-Gly-MIPMs possessed specific molecule recognition ability,the maximum apparent adsorption amount was 0.428mmol/g and the imprinting factor reached 2.19.
Keywords Glycylglycine,Molecular imprinting polymer microspheres,Emulsion polymerization
分子印迹聚合物可以被形象地描绘为识别“分子钥匙”的“人工锁”。近年来,分子印迹技术得到了蓬勃发展,分子印迹聚合物的形态由最初的块状发展到现在的印 迹微球,合成环境由原来的有机相发展至现在的水相,印迹分子也从小分子发展为水溶性生物大分子。印迹微球不仅省去了研磨、筛分等步骤,还具有规则的形状、 较大的比表面积,可方便地用作色谱填料[1]。水相中制备分子印迹微球则主要是针对 多肽、蛋白质等生物分子的水溶性特征,这样可以在不影响生物分子活性的条件下制备出具有选择识别性的印迹聚合物。在水相中制备分子印迹聚合物的最大难点在 于水分子会削弱印迹分子与功能单体之间的氢键作用,从而影响识别空穴的形成,因此研究在水相中制备并识别多肽类生物分子印迹聚合物,对药物、环境和生物样 品的分析、纯化意义重大[2,3]。
众所周知,通过悬浮聚合[4,5]、沉淀聚合[6~9]和乳液聚合[10,11]等方法可以方便地制备出聚合物微球。然而,悬浮聚合制备的微球粒径较大、分布较宽且不易控制,沉淀聚合则多在有机溶剂中进行,唯有乳液聚合可在水相中制备出单分散性好的聚合物微球,因此,乳液聚合可用于水相中分子印迹聚合物微球的制备。
双甘氨肽(Gly-Gly)是一种二肽类生物分子,可作为缓冲剂用于生物化学研究,在生产药用针剂细作稳定剂,在生物及医药研究中具有重要作用。本研究为 保持Gly-Gly分子的生物活性,采用低温氧化还原引发体系,通过乳液聚合在水相中制备了对Gly-Gly分子具有选择识别性的分子印迹聚合物微球。
1实验部分
1.1仪器与试剂
双甘氨肽(Gly-Gly,生化级),上海晶纯科技有限公司;甲基丙烯酸甲酯(MMA,分析纯),天津科密欧化学试剂厂;丙烯酰胺(AM,分析纯)、二甲 基丙烯酸乙二醇酯(EDMA,化学纯)、Span80(化学纯)、Tween80(化学纯),国药集团上海化学试剂公司;过硫酸钾(K
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