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搅拌转速对Bacillus subtilis分批发酵碱性果胶裂解酶的影响.pdf
第30卷第5期 东华大学学报(自然科学版) V01．30，NO．5
2004年10月 JoURNALOFDONGHUAUNIVERSITY Oct．2004
搅拌转速对Bacillussubtilis分批发酵碱性
果胶裂解酶的影响*
赵 政1，董云舟2，堵国成2，陈坚2，高卫东3
(1．东华大学化学与化工学院，上海，200051；2．江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室
江苏无锡，214036；3．江南大学纺织服装学院，江苏无锡，214063)
摘要在5L小型发酵罐上，考察了不同搅拌转速对细胞生长和碱性果胶裂解酶生产的影响。根据细胞生物量、酶活水平、
比细胞生长速率和比产物合成速率的变化情况，提出了两阶段搅拌转速控制策略：o～5h搅拌转速500r／rain；5h后搅拌转速
600
关键词：碱性果胶裂解酶，搅拌转速，Bacillussubtilis，聚半乳糖醛酸裂解酶，聚甲基半乳糖醛酸裂解酶
中图分类号：Q814
5．0，NaCl
果胶酶(pectinase)是指可以分解果胶质的一类 5．0，琼脂2．0，pH值7．0。
酶[1]。近年来逐渐发现碱性果胶酶可用于棉纺织 发酵种子培养基(g／L)：KH2P0412．0，
品的生物精练[2~4]，为纺织品清洁预处理又提供了K2HP04·3H20
一条可行的途径。 1．0，(NHt)2S042．5，玉米浆3．0，溶解于豆饼粉水
但是不同产地棉纤维表面果胶的含量和结构 提液中，pH值7．0。
均不同，至今对不同产地棉纤维表面果胶物质的研
究还很少。因此，同时高效合成两种甚至多种碱性 K2HP04·3H2036．7，CaCOa8．0，溶解于豆饼粉
果胶酶具有重要意义。 水提液中，pH值7．0。
本文在5L台式发酵罐中考察了不同搅拌转速 1．3培养方法
subtilis
对枯草芽孢杆菌BacillusWSH02一02生产 (1)种子培养方法接两环生长良好的斜面培
两种碱性果胶裂解酶的影响。根据不同搅拌转速 养物至装有50mL种子培养基的500mI，三角瓶
下细胞生物量、酶活水平、比细胞生长速率和比产 h；按
中，在37℃条件下220r／min摇瓶培养12
物合成速率的变化情况，特别是在单一搅拌转速下 10％接种量接入5L发酵罐中。
Bacillus
subtilis不能同时高效合成PGL(聚半乳糖
(2)小罐培养5I．小罐(韩国KF一5I，台式
醛酸裂解酶)和PMGL(聚甲基半乳糖醛酸裂解酶)
发酵罐)的装液量为3L，进气量4L／min，发酵过程
的问题，实验确定了发酵过程中两阶段搅拌转速控 中温度控制在37℃。
制策略，可以作为工业化生产碱性果胶裂解酶的参 1．4分析方法
考，并且在棉纺织品利用碱性果胶酶生物精练的应 (1)菌体生长量的测定取发酵液4mL，以
用具有一定的实际意义。 10000
r／min速度离心10rain，用稀盐酸洗至无
CaC03沉淀，再用蒸馏水洗两次，60℃干燥至恒重。
1 材料与方法
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