转人源胸腺肽α1基因聚球藻7942及其野生藻的培养.pdfVIP

第32卷第4蜗 工业微生物 Vd32No．4 00。2年12月 Indu“d州crobido斟 胁2002 转人源胸腺肽a。基因聚球藻7942及其野生藻的培养 汪琨’专耋套≥篡裳姜：厦煮。，盖’魏文鲈Q(7牛A(厦门大学生命科学院，厦门3610Q5) Uf’7 ，-l 摘要 探讨光照强度、光照时间、接种量和不同碳氮源对转人源胸腺肽∞基因聚球藻7942(转 化藻)厦其野生藻(聚球藻7942)生长的影响以及生长过程中pH的变化。研究发现，无论是野生藻 还是转化藻的生长都表现出全天光照优于半天光照。三角瓶培养转化藻生长的最佳光照度为 1500 1)【，野生藻生长的最佳光照度为2000lx：光反应器培养两种藻生长的适宜光照强度均随藻体浓 度的变化而改变。为了尽量缩短延滞期，转化藻接种量OD。≥o．08，野生藻OD。≥o．05。两种藻 体生长适宜的碳氮源为№Hcq和KNq，生长过程中pH值变化趋势基本相似。 关键词：转基西聚球藻7942；聚球藻7942；光合自养；人源胸腺素a。 20世纪90年代以来，蓝藻基因工程研究与开发成 为藻类基因工程中极具生命力的一个领域。有着重大 高密度培养奠定基础。 的科学意义和良好的应用前景““】。以聚球藻7942作 1材料与方法 为受体表达外源基因已有许多成功的报道““1。本实 验室承担的国家海洋8∞项目是进行人源胸腺肽n。 1．1材料 sp．PCc7942， (孤，竹Ⅻ饥啕，TQ．)基因在蓝藻中的高效表达的研究，已 藻种：聚球藻7942：跏Ⅻb。∞cW 建立了转化系统，构建了高效表达载体，成功筛选到转 由青岛海洋大学提供 基因蓝藻，并检测到胸腺肽嘶的表达”’…。 转人源胸腺素a。基因聚球藻7942：由本实验室 在成功地构建转基因藻之后，实现高密度培养 构建 和高效表达是转基因藻能否走向应用的关键环节之 培养基：BG一儿培养基”21 一。由于转基因藻的构建工作在国内外刚刚兴起， 抗生素：卡那霉素(上海生工生物工程技术服务 转基因藻高密度培养的研究更鲜有报道”1。据国内 有限公司) 报道，经条件优化研究后转金属硫蛋白(MT)基因的 仪器：722型光栅分光光度计(厦门分析仪器厂) 集胞藻6803培养密度可达1．44∥L，比传统的培养pH一206酸度计(上海医用仪器制造厂) 水平(0．1讥．)提高13．4倍”…。可见，开展转基因蓝 sT一Ⅱ型照度计(上海分析仪器厂) 藻高密度培养的研究，可为转基因藻的大规模培养 光反应器(自制) 提供理论依据，并促进转基因藻的实用化。 1．2培养方法 聚球藻＆t—kcoccⅢsp．PcC7942是一种蓝藻， 主要通过光合自养进行生长”“。本文以转人源胸 养基(培养转化藻时需添加20～25p∥—nL卡那霉素， 腺肽％基因聚球藻7942及其野生藻(聚球藻7942) 为研究对象，着重探讨光照度、光照方式、接种量和 不同碳氮源及pH对这两种藻生长的影响，以期为 行室温培养。 国家海洋863项目(项目号819—04—03)部分研究丁=作 第一作者简介：汪琨(1976一)，女．硕士研究生 *联系作者 一15— 万方数据 第4期 工业微生物 第32卷 光反应器培养：5L光反应器中装3．5L培养基， 其他条件相同，改变藻液的接种量，考察其对转