《DNA的粗提取与定》实验教学设计.doc

《DNA的粗提取与鉴定》实验教学设计 年级 组别 高二 班级 高二1班 审阅 教师 李建荣 授课时间 2014年6月20日 课 题 DNA的粗提取和鉴定实验 课 型 新授课 课标 要求 掌握DNA提取和鉴定的原理和实验操作 教 学 目 标 知识与能力 能够说出DNA的提取、纯化与鉴定的实验原理 过程与方法 通过实验培养学生的动手能力与分析问题的能力 情感、态度与价值观 通过实验的学习，让学生了解到生物世界的奥秘 教学 重点 提取和鉴定DNA的原理与实验操作 教学 难点 提取和鉴定DNA的实验原理与实验操作 教学 方法 讲授法、小组合作法、边讲边练 教学程序设计 教 学 过 程 及 方 法 环节一 明标自学 过程设计 二次备课 【学习目标】 1、能够说出DNA的提取、纯化与鉴定的实验原理 2、通过实验培养学生的动手能力与分析问题的能力 3、通过实验的学习，让学生了解到生物世界的奥秘 【新课导入】 【自学指导】 根据《导学案》自主阅读选修一内容，归纳提取DNA的原理 1、实验原理 【自学效果展示】 一、DNA的提取 1、提取DNA的原理： 1)、 DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。 2)、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 鉴定DNA的原理： DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 2、实验过程：师生共同学习 以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取 鸡血细胞做实验材料的原因 ①鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得 ②鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长 ①柠檬酸钠作用及作用机理 防止血液凝固。 柠檬酸钠能与血浆中的Ca2+发生反应，生成柠檬酸钙络合物，血浆中游离的Ca2+大大减少，血液就不会凝固 ②注意事项 鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少DNA的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液 讨论：提取鸡血中的DNA时，为什么除去血液中的上清液？ 答：血液分为两部分，一部分是血浆，一部分是血细胞，离心后除去的上清液是血浆 3、过程（结合导学案边做边学） ①提取鸡血细胞的细胞核物质 ②溶解细胞核内的DNA 【合作释疑一】 （1）为什么要加入蒸馏水？加入蒸馏水后细胞会有什么变化？ 答：让细胞内浓度大于周围溶液的浓度，细胞会吸水以至胀破 用玻璃棒搅拌有什么意义？ 答：用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。注意应沿一个方向快速搅拌，但也不能太快太猛，防止打碎DNA 滤去的是什么物质？得到的是什么？ 答：过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质；得到的是与蛋白质等物质结合在一起的DNA ③析出含DNA的粘稠物 ④滤取含DNA的粘稠物 ⑤将DNA的粘稠物再溶解 ⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液 ⑦提取含杂质较少的DNA 【合作释疑二】（1）为什么要加50mL的冷酒精？ 答：因为DNA不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解在酒精中，使含杂质较少的DNA丝状物可以析出,悬浮于溶液中 观察丝状物呈什么颜色？ 答：白色 教 学 过 程 及 方 法 环节二 合作释疑 环节三 点拨拓展 过程设计 二次备课 二、DNA的鉴定 【讨论：】 比较两个试管中溶液的颜色有什么不同？ 答：有丝状物的试管变成蓝色，另一试管还是原来颜色 这一鉴定结果说明什么问题？ 答：提取出的丝状物是DNA DNA的直径约为20×10-10 m，实验中出现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的大小？ 答： DNA分子直径只有2 nm。丝状物是多个DNA子聚在一起形成的 【点拨拓展：】 （1）此实验过程中有几次使用蒸馏水？几次过滤，几次析出，几次搅拌？分别在哪一步？ 答：整个实验共“两次蒸馏水，三次过滤，两次析出，六次搅拌” ①两次蒸馏水 第一次：细胞吸水胀破 第一步 第二次：使 DNA黏稠物析出 第三步 ②三次过滤 第一次： DNA存在于滤液里 第一步 第二次： DNA被留在纱布上 第四步 第三次： DNA存在于滤液里 第六步 过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关，第二次要用其滤出的黏稠物有关，所以要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其滤液，使用的纱布为1－2层 ③两次析出 第一次：用0.14 mol／L 的NaCI溶液含杂质多 第三步 第二次