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第七章_蛋白质检验.doc
第八章 血浆蛋白质的测定
第一节 概 述
一、血浆蛋白质的组成及功能
血浆蛋白质是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份90%左右,目前已经研究的血浆蛋白质有300多种,分离出的纯品约100来种,除免疫球蛋白外,主要由肝细胞合成,主要功能有以下几方面:
1. 维持血浆胶体渗透压;清蛋白。
2. 作为某些物质的载体,起运输作用;如清蛋白能与多种物质结合(FA、胆红素),某些球蛋白具特异地运输某些物质的功能,运铁蛋白、运皮质醇蛋白。
3. 维持体液pH恒定;血浆蛋白pI一般都小于7.4是弱酸,一部分以弱酸盐形式存在,构成缓冲对。
4. 免疫功能;血浆中许多具有免疫功能的球蛋白,主要由浆细胞合成,电泳时位于γ区带,如IgG、IgA、IgM、IgD、IgE,此外,还有具有免疫作用的非特异球蛋白,如补体。
5. 凝血与纤溶作用;凝血与纤溶是一对矛盾的统一、凝血因子与纤溶因子绝大部分是血浆蛋白质,它们促进血液凝固,防止血液流失和溶解血栓,防止重要脏器的动脉栓塞。
6. 营养作用;血浆蛋白质可分解成AA,用于合成组织蛋白或氧化供能。
7. 催化作用;血浆中有许多酶类,其中部分在血浆中发挥作用,称血浆功能性酶,如凝血酶原、纤溶酶原、铜蓝蛋白、LPL、LCAT、肾素等。
二、血浆中几种主要的蛋白质
(一)前白蛋白(prealbumin,PA)分子量54kD,由肝细胞合成,电泳时移动速度较白蛋白快,位于其前方面得名,半寿期短为12h。PA是一类运载蛋白,一种能与甲状腺素结合,称为甲状腺结合蛋白,一种能与VitA结合,称为VitA结合蛋白,常用测定方法是免疫学方法,正常参与范围0.2~0.4g /L,急性炎症,恶性肿瘤,肝硬化或肾炎时下降。
(二)白蛋白(albumin,Alb)分子量66458,由肝实质细胞合成,半寿期15~19天,是血浆中含量最多的蛋白质,占40%~60%,主要功能,维持血浆胶体渗透性,缓冲作用,运输作用,营养作用,调节某些激素或药物活性。
白蛋白可微量地通过肾小球,约0.04%,但大部分被血小管重吸收。
白蛋白的测定方法目前主要是溴甲酚绿(BCG)法,正常参考范围35~55g/L,血浆白蛋白增高临床少见,主要见于严重失水引起血液浓缩,血浆白蛋白降低临床常见。①合成障碍急;慢性肝炎。②丢失过多;肾病综合症、慢性肾小球、肾炎、糖尿病、系统性斑狼疮等。③分解过多;营养不良,慢性胃肠道疾病。
(三)α1-酸性糖蛋白(α1-acid glycoprotein,AAG)、分子量约4万,含糖约45%,pI2.7~3.5,主要由肝细胞合成,某些肿瘤组织也可合成。
AAG是主要的急性时相反应蛋白,急性炎症时上升,与免疫防御功能有关。
AAG测定方法,使用AAG抗体,进行免疫扩散法或免疫比浊法检测,正常参考范围0.5~1.5g/L,主要作为急性时相反应的指标,风湿病、恶性肿瘤、心肌梗塞患者上升,营养不良、严重肝病下降。
(四)α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1AT或AAT),分子量5.5万,pI4.8,含糖10%~12%,电泳时位于α1区带,占90%左右,由肝细胞合成,能抑制多种酶活性,尤其是蛋白酶,占血清中抑制蛋白酶活力的90%左右,抑制作用有明显的pH依赖性,在中性和弱碱性中活力最大。
AAT也是一种急性时相反应蛋白,主要功能是对抗多形核白细胞吞噬作用时释放的溶酶体蛋白水解酶。
AAT测定方法,目前主要采用免疫化学法,正常参考范围,新生儿血清1.45~2.7g/L,成人0.78~2.0g/L,AAT下降见于胎儿呼吸窘迫症,AAT缺陷所致的肺气肿、肝硬化等,AAT上升见于急性炎症、外科手术后,长期服用可的松药物,妊娠及服用避孕药物。
(五)甲胎蛋白(α1-fetoprotein,AFP)分子量6.5~7万,pI4.75含糖量4%,主要由胎儿肝合成,妊娠13~15周血清AFP含量最高,以后逐渐下降,出生时仅为高峰期的1%~0.1%,周岁时接近成人水平,仅10~30μg /L,功能不详。
AFP作为肿瘤标志物,对原发性肝Ca的诊断很有价值,80%以上原发性肝Ca患者血清AFP上升,但无特异性,肺Ca、胰腺Ca,肝硬化患者血清AFP亦升高,此外,羊水AFP含量测定可用于胎儿产前监测,AFP↑提示胎儿畸形(神经管缺损、脊柱裂、无脑儿),死胎。
AFP测定方法,火箭电泳放射自显影,放射免疫分析法,灵敏度特异性很高,有放射污染。反向间接血凝法(RPHA),操作简便,定量不够精细,适合于普查、筛选。酶联免疫法(ELISA),灵敏度接近放免,且操作简便,无放射污染,便于推广。
(六)结合珠蛋白(haptoglobin,Hp)又名触珠蛋白,是一种糖蛋白,主要由肝合成,电泳时位于α2区带,是一种急性时相反应蛋
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