RT_PCR克隆甜菜硝酸还原酶cDNA全长序列及分析_张杰.pdf

28 4 2008 7 Vol. 28 No. 4 BULLET IN OF BOTAN ICAL RESEARCH Ju.l , 2008 RT-PCR cDNA 1, 2 1 2 2 2 1* 张 杰 彭胜民 周 波 战晴晴 张荣沭 马凤鸣 ( 1. , 150030) ( 2. , 150040) 根据 G enBank 中已公布的甜菜(B eta vulg aris)硝酸还原酶( nitrate reductase)基因序列 ( gb |ABW050 8. 1|), 设计引物, 以 50mmol# L- 1 KNO 溶液处理的甜菜幼苗为材 , 从总RNA 中 3 通过 RT-PCR 分离得到 一个硝酸还原酶基因, 其 cDNA 长 2 760 bp, 包含了完整的基因编码序列, 与已公布的硝酸还原酶基因序列相似性达 % Southern杂交分析表明, 硝酸还原酶基因在甜菜 基因组中可能以两 个拷贝或低拷贝形式存在根据其编码的氨基酸序列, 利用生物信息学预测了 其亚细胞定位和蛋白质的三级结构 甜菜; 硝酸还原酶; 基因克隆; RT-PCR : Q78 : A : 1673- 5102( 2008) 04- 0412- 05 C lon ing and Sequence Analysis of N itrate R eductase G ene from Beta vulgaris by RT-PCR 1, 2 1 2 2 2 1* ZHANG Jie PENG Sheng-M in ZHOU Bo ZHAN Q ing-Q ing ZHANG Rong-Shu MA Feng-M ing ( 1. College ofAgronom y, Northeast Agricu lturalUniversity, H arb in 150030) ( 2. College of Life Sciences, Northeast Forestry Un iversity, H arbin 150040) Abs tract A pair of prmi ersw as designed accord ing to the sequence of nitrate reductase gene in Gen- Bank ( gb |ABW050 8. 1|). The homolog cDNA w ith 2760 base pairs of nitrate reductase genew as ob-