两次双水相萃取结合高效液相色谱法选择性分离唾液蛋白质的.pdf

２０１４年６月 Ｖｏｌ．３２ Ｎｏ．６ Ｊｕｎｅ ２０１４ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ６００～６０３ Ａｒｔｉｃｌｅ ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１４．０３０３１ Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｔｗｏ ｓｔｅｐｓ ａｑｕｅｏｕｓ ｔｗｏ⁃ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｆｏｒ ｓａｌｉｖａ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ １，２ １∗ ３ １ ＺＨＡＯ Ｘｉｎｙｉｎｇ ，ＱＵ Ｆｅｎｇ ，ＱＩＮ Ｈａｏ ，ＬＵＯＡｉｑｉｎ （１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００８１，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｂｅｉｊｉｎｇ ＣｅｎｔｅｒｆｏｒＰｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ ＣｈｅｍｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００８９，Ｃｈｉｎａ； ３．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌＢｉｏｌｏｇｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１０１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｓａｌｉｖａｐｒｏｔｅｉｎ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｏｎｅ⁃ｓｔｅｐ ａｑｕｅｏｕｓ ｔｗｏ⁃ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ （ＡＴＰＥ） ｉｎ ｔｈｅ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ １５％ （ｍａｓｓ ｒａｔｉｏ ｉｆ ｎｏｔ ｓｐｅｃｉｆｉｅｄ） ＰＥＧ⁃４０００／ ８％ ＮａＨ ＰＯ ｗａｓ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ． Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｔｏｐ ａｎｄ ２ ４ ｂｏｔｔｏｍ ｐｈａｓｅｓ ｗｅｒｅ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＨＰＬＣ） ｒｅｓｐｅｃ⁃ ｔｉｖｅｌｙ． Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ， ｍｏｒｅ ｓａｌｉｖａ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｅａｋｓ ｉｎ ｔｈｅ ｔｗｏ ｐｈａｓｅｓ ｗｅｒｅ ｓｈｏｗｎ． Ｓａｌｉｖａｐｒｏｔｅｉｎ ｐｅａｋｓ ｉｎ ５０ ｍｉｎ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏｔｅｎ ｓｐｅｃｉｆｉｃｇｒｏｕｐｓｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｅｄｉｎｔｏ ｓｉｘ ｓｅｃｔｉｏｎｓ ｂａｓｅｄ ｏｎｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｉｎｔｈｅｔｏｐ ａｎｄｂｏｔｔｏｍｐｈａｓｅｓ．Ｔｈｅｎ，ｔｈｅｔｏｐ ｏｒｂｏｔｔｏｍｐｈａｓｅｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ ｓｔｅｐ ＡＴＰＥ． Ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｒｅａｓｏｎｓ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐａｒｔｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｒｅ ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ ｂｒｉｅｆｌｙ． Ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｔｈａｔｓｏｍｅｐｒｏｔｅｉｎｓｃａｎｂｅｓｅｐａｒａｔｅｄｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙｉｎｏｎｅ⁃ｓｔｅｐＡＴＰＥ，ｗｈｉｌｅｓｏｍｅｃａｎｂｅｓｅｐ⁃ ａｒａｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｔｗｏ⁃ｓｔｅｐ ＡＴＰＥ． Ｔｈｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏ