优化TAIL_PCR方法克隆棉花抗逆相关转录因子编码基因.pdf

棉 花 学 报 ， （ ）： Cotton Science 2010 22 3 195~201 优化TAIL-PCR 方法克隆棉花抗逆相关 研究与进展 转录因子编码基因 梁成真，张 锐，孙国清，孟志刚，周 焘，丁忠涛，郭三堆* 中国农业科学院生物技术研究所 国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程北京 ( / , 100081) 摘要： 类转录因子属于碱性亮氨酸类蛋白， 在依赖 的逆境信号传导途径中起重 ABF/AREB/ABI5/DPBF ABA 要的作用。 本研究结合该类转录因子的结构特点，利用3′ RACE 技术和优化的TAIL-PCR 技术成功获得棉花 中三个该家族成员编码基因。 进一步验证结果表明两步 成功获得基因完整的 、 以及部分 PCR ORF 3′ UTR 5′ UTR 序列。 本研究所获基因为棉花抗逆基因工程提供了候选基因源，优化后的TAIL-PCR 技术为克隆棉花中 目的基因提供了一种简便高效的方法。 关键词：棉花； ；转录因子； ；抗逆相关基因 ABF/AREB/ABI5/DPBF TAIL-PCR 中图分类号： 文献标识码： S562.035.3 A 文章编号：1002-7807(2010)03-0195-07 Cloning of Stress-related Transcription Factors Gene from Cotton by Optimized TA IL-PCR LIANG Cheng-zhen, ZHANG Rui, SUN Guo-qing, MENG Zhi-gang, ZHOU Tao, DING Zhong-tao, GUO San-dui* (Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences/ National Key Facility for Crop Gene Resources and Genetic Improvement, Beij ing 100081, China) Abstract: ABF/AREB/ABI5/DPBF transcription factors belong to basic leucine zipper protein, this kind of transcription factors plays an important role in the signal transduction pathways of ABA-dependent abiotic stress. In this study, taking structure char- acteristics of ABF/AREB/ABI5/DPBF as the research object, we cloned three