儀器分析實驗螢光光度計.ppt

儀器分析實驗 螢光光度計 旋光光度計 以下情況可以導致發光： 燃燒。 熱發光，比如白熾燈，太陽等發光，發出的光一般為接近黑體譜的灰體譜，而且還會包含有特定的原子譜線。 冷發光，指物體在發光過程中不產生大量的熱量，溫度沒有明顯的升高，一般保持在常溫。 光致發光，由光照（通常是紫外線或X射線）激發的光稱為光致發光，例如熒光，磷光。 電致發光。 陰極射線發光，由陰極射線（高能電子束流）所引起的發光稱為陰極射線發光。 化學發光，由化學反應所引起的發光稱為化學發光。 生物發光，生物體的冷發光現象是生物發光，例如螢火蟲發的光。 輻射（致）發光。 聲致發光。 摩擦發光。 同步輻射。 雷射。 星際物質在引力作用下發光。 螢光產生的微觀機制 具有螢光性的分子吸收入射光的能量後，其中的電子從基態S0（通常為自旋單重態）躍遷至具有相同自旋多重度的激發態S*2。 處於激發態 的電子可以通過各種不同的途徑釋放其能量回到基態。 電子可以經由非常快的（短於10 ? 12 秒）內轉換過程無輻射躍遷至能量稍低並具有相同自旋多重度的激發態S*1 ，緊接著從 以發光的方式釋放出能量回到基態S0，這裡發出的光就是螢光，其頻率為νF。 由於激發態 的能量低於 ，故在這一過程中發出的螢光的頻率νF低於入射光的頻率νEX。螢光態的壽命為10 ? 8至10 ? 5秒，這就是前面提到的“立即”退激發的具體含義。 通常電子從激發態 躍遷至 的內轉換過程非常的快，而且產生螢光的物質的分子可以通過所謂的振動弛豫過程很快地（約10 ? 11 秒）經由碰撞達到熱平衡，這兩個效應使得絕大部分螢光源自於振動基態 。總結產生螢光的反應過程為： 電子也可以從激發態 經由系間跨越過程無輻射躍遷至能量較低且具有不同自旋多重度的激發態 （通常為自旋三重態），再經由內轉換過程無輻射躍遷至激發態 ，然後以發光的方式釋放出能量而回到基態S0。 由於激發態 和基態S0具有不同的自旋多重度，這一躍遷過程是被躍遷選擇規則禁戒的，從而需要比釋放螢光長的多的時間（從10 ? 4秒到數分鐘乃至數小時不等）來完成這個過程；而且與螢光過程不同，當停止入射光後，物質中還有相當數量的電子繼續保持在亞穩態 上並持續發光直到所有的電子回到基態。這種緩慢釋放的光被稱為磷光。 奎寧螢光光譜 由光照（通常是紫外線或X射線）激發所引起的發光稱為光致發光，例如螢光和磷光； 由化學反應所引起的發光稱為化學發光，演唱會上用的螢光棒是通過兩種化學液體混合後發生化學反應發光的； 由陰極射線（高能電子束流）所引起的發光稱為陰極射線發光，電視機顯現管的螢光屏發光就是陰極射線發光； 生物體的冷發光現象是生物發光，比如螢火蟲發出的光，是「螢光」 「螢」字在古漢語中與「熒」字通假，部分華文地區，「螢」字與昆蟲有關。螢光在臺灣多稱螢光；在中國大陸多稱熒光，而「螢光」則通常是指螢火蟲發出的光。 螢光光度計螢光光度計實驗要項 一.螢光光譜分析原理 1.螢光物質在激勵Excitation光譜Ex及發射Emission光譜Em時有最大吸收。 2.水楊酸及奎寧為螢光物質，其分子構造有相似性。 3.日常生活常見可能含螢光物質之物品及其對人體或環境可能造成之危害。 4.本實驗使用藥品之物質安全資料(MSDS)。 二. 藥品配製 1.1ppm與1M、1N濃度的溶液之關係。 2.配製製作檢量線用的各種濃度標準溶液。 3.標示所配製的各瓶溶液之真實濃度（ppm）。 4.誤差產生之原因及誤差估計。 三. 儀器操作 1.螢光光度計與紫外光光度計之差異。 2.繪製激勵Excitation光譜及發射Emission光譜。 3.繪製檢量線。 螢光光度計實驗完成簽認 1.配藥器材洗淨並回歸原位。 2.螢光光度計及連結電腦關機。 3.桌面維持整潔。 4. 3.5”磁片存有Ex及Em光譜圖與檢量線圖印出。 5.石英cell 及磁片歸還老師，並完成實驗報告。 ? 簽認組員： ? 教師簽認： 日期：96年3月7日 旋光光度計旋光儀中文使用手冊 A2-R805 A.中文使用手冊應包含一正式封面（含製作人姓名、日期）及以下五項，各項詳細說明如下： I.旋光儀原理（參考儀器分析課本） II.硬體說明 1.儀器型號、製造商、規範、購價、購入日期、維修紀錄 2.儀器所在位置、構造說明 3.常見錯誤訊息及處理方法 4.廠商支援服務人員／電話 III.iRM程式MENU 原文MENU架構，中文說明各項功能 IV.開關機程序 含暖機時間 V. 標準測試操作程序及旋光儀原理