刺五加鲨烯环氧酶基因cDNA的克隆及序列分析_邢朝斌.pdf

第 37 卷第 2 期 Vol. 37 ，Issue 2 20 12 年 1 月 January ，20 12 · · 资源与鉴定 刺五加鲨烯环氧酶基 因 cDNA 的克隆及序列分析 * ， ， ， ， ， 邢朝斌 曹蕾 陈龙 何闪 李宝财 朱金丽 ( ， 063000) 河北联合 大学 生命科 学学院 河北 唐 山 ［ ］ : cDNA 。 : 摘要 目的 对刺五加鲨烯环氧酶基 因的 进行克隆及序列分析 方法 采用改 良的异硫氰酸胍法提取刺五加总 RNA ， cDNA ， SE cDNA ， RT-PCR SE cDNA 。 逆转录为 根据已报道 的人参 基 因 序列设计 引物 利用 法克 隆刺五加 基 因的 序列 : 2 cDNA( SE1 SE2) ， 1 665 ，1 629 bp ， 554 ，542 。SE1 ，SE2 结果 克隆了 个序列不同 的 和 开放 阅读框分别长 分别编码 个氨基酸 91. 49% ，92. 55% ， SE1 ， 93. 45% ，94. 87% 。 间的核苷酸和氨基酸一致性分别为 两者与三七 的氨基酸序列相似性最高 分别为 SE1 ，SE2 均含有 1 个 FAD 结合 区域 ，SE1 ，SE2 推测的氨基酸分别存在 2 个和 4 个跨膜螺旋 。结论: 首次分离并报道 了刺五加 2 SE cDNA ， 。 的 个 基 因 序列 为刺五加的次生代谢工程研究奠定 了基础 ［ ］ ; ; ; RT-PCR 关键词 刺五加 鲨烯环氧酶基 因 克隆 Eleutherococcus senticosus Harms 、 、 1 刺五加 根 茎 材料 ［1］ ， ， ， 叶均可入药 是 我 国传统 的珍 贵药 用植 物 具 增 供试刺五加采 自黑龙江省鸡西市 经河北联合 、 、 、 强免疫 功 能 抗 疲 劳 抗 衰 老 抗 辐 射 等 药 理 活 大学生命科学学 院邢朝斌副教授鉴定为五加科植物 ［2］ 。 ， ， 性 刺五加 中主要 含 有 苷类 黄酮类 多糖等成 E. se