动物实验室的生物安全防护.ppt

实验动物实验室的生物安全防护 病毒学国家重点实验室 武汉大学医学病毒学研究所 主要内容 实验动物的护理和使用原则 实验过程的行为规范 实验动物使用程序和要求 动物安全实验室设施与防护要求 一、实验动物的护理和使用原则 二、动物实验过程的行为规范 1.物理限制 指在实验过程中包括检查、收集标本、给药、治疗或实验操作等，用手或工具限制动物活动的过程。 物理限制的主要原则和要求 限制的工具不能作为常规的饲养工具。 工具的设计应合理，不要仅考虑实验的便利，主要考虑尽量减少动物的不适，避免伤害。 尽量减少限制的时间，以达到实验目的为基准。 在限制过程中，如果发生损伤或严重的行为改变，应暂停或禁止限制，并给予处理或治疗。 保证实验人员和周围人员的安全。 有些实验需要对动物进行手术，即打开或刺穿动物的身体，对动物的身体或生理机能产生较大的损害，同时，实验人员也容易被血液/体液污染或被器械、针头刺伤，存在潜在生物污染的威胁，因此必须做到 操作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法。 禁止不必要的重复操作。 不提倡利用一个动物进行多个手术实验，但是，为充分利用动物资源，经动物伦理委员会许可，在可能的条件下可以实施。 严格实验操作规程，防止发生血液/体液外溅和针刺伤，避免生物污染。 手术后的动物、标本以及所用器具材料等必须按规定程序妥善处置。 实验用动物原则上要求随时饮食，如果一些实验需要动物限制食物或水的摄入量，应保证动物存活所需要的最低需求量 1. 血液和体液标本的处理 用于抗体、抗原、病原微生物、生化指标等检查的血液和体液，按照要求进行处理并检测，检测后的标本经121℃，30min高压消毒处理。 2. 动物脏器组织的处理 动物器官组织，尤其是用于病原微生物分离的组织按照标准程序进行处理；用于病理切片的组织，均需要经过甲醛固定后再进行切片。剩余的组织经121℃，30min高压消毒处理。 3．动物尸体的处理 安乐处死后的动物尸体，取材完毕后，经121℃ 30min高压灭菌处理后，集中送环保部门处理。动物生物安全三级（ABSL-3）实验室及以上级的实验室的感染动物尸体需经室内和双扉两道高压灭菌，才能移出实验室。 4. 动物咽拭子的处理 用于病原分离和PCR检测的咽拭子，按照各自的要求处理后，进行病毒分离和PCR检测，剩余的标本经121℃，30min高压消毒处理。 5. 病原分离培养物的处理 病原分离的培养物，不论是阳性还是阴性结果，均需经121℃，30min高压消毒处理。。 三、实验动物使用程序和要求 1.实验动物的基本使用程序和要求 实验室如需要使用实验动物，应首先向生物安全和伦理委员会提出申请，填写申请表 使用实验室得到认可后，根据申请表中申请的动物种属和数量，安排实验动物的饲养和使用。 实验动物必须在指定的区域内饲养和使用，禁止在实验室饲养动物。实验操作结束时，动物须返回指定的饲养区域内，不能在实验室内过夜。 动物实验应在实验室内指定的区域进行。 2.含有感染性材料的动物实验要求 涉及感染性材料的操作要在生物安全柜中进行，并防止泄露在安全柜底面。操作包括感染动物的解剖、组织的取材、采血及动物的病原接种。 动物笼具在清洗前先做消毒处理。 污物、一次性物品需放入医疗废物专用垃圾袋中，经高压灭菌后方可拿出实验室。 动物尸体用双层医疗废物专用垃圾袋包裹后，放入标有动物尸体专用的容器中，用消毒液喷雾容器表面后，运至解剖区域剖检。 生物安全柜使用后应用消毒液擦拭、揩干。 废液需按比例倒入有消毒液的桶中，倒入时需沿容器壁轻倒并戴眼罩，防止溅入眼中。 如果有感染性物质溅到生物安全柜上、地上以及其他地方，应按“菌，毒外溢在台面、地面和其他表面”处理。 每天工作结束时，应用消毒液擦拭门把手和地面等表面区域。 废物放入高压灭菌器内时需同时粘贴指示条，物品移出前观察指示条是否达到灭菌要求。颜色不符时需重复高压灭菌。 高压灭菌器需每月做灭菌测试一次，并作记录。 3.小动物的饲养 小动物主要指小鼠、大鼠、豚鼠等啮齿类动物，其饲养应遵循下列原则： 使用动物必须按国家标准或实验特殊要求检验合格，充分准备后进入系统，饲养人员应按实验设施规定程序要求进入系统。 及时观察动物饮食、精神状况，有无异常表现，患病或死亡。 动物应可自由进食、饮水。定期检查水、料是否充足并及时补给。同时保证其他饲养条件完备。 4.大动物饲养 大动物主要指狗、猪及非人类灵长类动物等 使用动物必须按国家标准或实验特殊要求，检验合格，充分准备后方可进入动物实验室。 应将