原代大鼠肝细胞的分离和培养_蒋永生.pdf

第 31 卷 第 5 期 中 华 中 医 药 学 刊 Vol． 31 No． 5 2 0 1 3 年 5 月 CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE May 2 0 1 3 原代大鼠肝细胞的分离和培养 1 2 1 1 1 ， ， ， ， 蒋永生 程 向东 刘文洪 项海 姚立 (1． ， 310053 ;2 ． ， 310022) 浙江中医药大学 浙江杭州 浙江省肿瘤医院 浙江杭州 : : ， 。 摘 要 目的 探讨原代大鼠肝 细胞分 离及培养的简易方法 建立稳 定 简便 的大鼠原代肝 细胞分 离培养方法 : ， DMEM: 方法 采用改 良原位 两步循环灌流法及低速 离心法分 离原代大鼠肝 细胞 常规 高糖培养基培养原代大鼠 ， 1 ， 。 : 肝 细胞 测定 周 内生长情况 倒置显微镜及扫描 电镜观察肝 细胞形 态变化 结果 倒置显微镜 下观察肝 细胞在 3 h ， ，24 h ， ， 接种后 基本完成贴壁 贴壁的细胞呈 卵圆形 后胞体变大变平 随后 细胞相互靠拢呈 岛状或条 索状连接 3 d 后扫描 电镜 下细胞呈现 良好形 态。结论: 用改 良原位 两步循环灌注法及低速 离心法成功分 离并培养原代大鼠 ， ， 。 肝 细胞 可操作性强 可在具备基本 细胞培养条件的实验 室推广 : ; ; ; 关键词 大鼠 原代肝 细胞 分 离 培养 中图分类号:R － 332 文献标志码:A 文章编号:1673 － 77 17 ( 2013) 05 － 1111 － 02 Isolation and Culture of Primary Rats Hepatocytes JIANG Yongsheng1 ，CHENG Xiangdong2 ，LIU Wenhong1 ，XIANG Hai1 ，YAO Li1 (1． Zhejiang Chinese Medical University ，Hangzhou 310053 ，Zhejiang ，China ; 2 ． Zhejiang Cancer Hospital ，Ha