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尚辅网 尚辅网 本章内容 一、细胞对氧的需求(为什么要供氧?为什么要 控制溶氧?) 二、发酵过程中氧的传递(如何实现供氧?如何控制溶氧?) 三、影响氧传递的因素 四、摄氧率、溶解氧、KLa的测定 一、细胞对氧的需求 (一)氧在微生物发酵中的作用 (二)可利用氧的特征 (二)微生物的耗氧特征 (四)溶解氧控制的意义 (一)氧在微生物发酵中的作用(对于好气性微生物而言) 呼吸作用 直接参与一些生物合成反应 (二)可利用氧的特征 只有溶解状态的氧才能被微生物利用。 1.微生物需氧量的表示方式 (1)呼吸强度(比耗氧速率) QO2 :单位质量干菌体在单位时间内消耗氧的量。 单位:mmolO2/(kg干菌体·h)。 (2) 摄氧率γ(耗氧速率):单位体积培养液在单位时间内消耗氧的量。单位: γ=QO2·x x——细胞浓度,kg(干重)/m3 2. QO2与溶氧浓度CL关系 (1) 当CLCcr时, QO2= (QO2)m (2) 当CL Ccr时, k0: 亲和常数(半饱和常数), 单位:mol/m3 k0特征: k0越大,亲和能力越小, QO2越小。 不同微生物的k0特征值不一样,可以此作为通气操作的依据。 (3) Ccr的定义 微生物的比耗氧速率受发酵液中氧的浓度的影响,各种微生物对发酵液中溶氧浓度有一个最低要求,即不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度,称为临界氧浓度,以Ccr表示。 CL Ccr,QO2 保持恒定 CL Ccr, QO2 大大下降 微生物对氧的需求 3. 培养过程中细胞耗氧的一般规律 培养初期: QO2逐渐增高,x较小。 在对数生长初期:达到(QO2 )m,但此时x较低, γ并不高。 C. 在对数生长后期:达到γm, 此时 QO2 (QO2 )m , xxm D. 对数生长期末:S↓, OTR↓, QO2 ↓ 而γ∝(QO2 , x , OTR), 虽然x=xm,但 QO2、 OTR 占主导地位,所以 γ↓ E. 培养后期:S→0,QO2 ↓↓, γ↓↓ 4. 影响微生物耗氧的因素 微生物本身遗传特征的影响,如 k0↑,QO2↓ 培养基的成分和浓度 碳源种类 耗氧速率:油脂或烃类葡萄糖 蔗糖 乳糖 培养基浓度 浓度大, QO2 ↑; 浓度小, QO2↓ 菌龄的影响:一般幼龄菌QO2大,晚龄菌QO2小 4. 影响微生物耗氧的因素(续) 发酵条件的影响 pH值→ 通过酶活来影响耗氧特征; 温度→ 通过酶活及溶氧来影响耗氧特征:T ↑, DO2 ↓? 代谢类型(发酵类型)的影响 若产物通过TCA循环获取,则QO2高,耗氧量大 若产物通过EMP途径获取,则QO2低,耗氧量小 溶解氧浓度对细胞生长和产物合成的影响可能是不同的,所以须了解长菌阶段和代谢产物形成阶段的最适需氧量。 氧传递速率已成为许多好气性发酵产量的限制因素。 目前,在发酵工业上氧的利用率很低,因此提高传氧效率,就能大大降低空气消耗量,从而降低设备费和动力消耗,且减少泡沫形成和染菌的机会, 大大提高设备利用率。 二、发酵过程中氧的传递 (一)供氧的实现形式 (二)发酵过程中氧的传递 1. 氧的传递途径与传质阻力 2. 气体溶解过程的双膜理论 3. 氧传递方程 4.发酵过程耗氧与供氧的动态关系 (一) 供氧的实现形式 摇瓶水平:摇床转速慢,装量多 搅拌缓和,通气缓和 表面通气,膜透析(扩散) 摇瓶水平:转速快,装量少 通无菌空气并搅拌 气升式 1.氧的传递途径与传质阻力 (1)双膜理论的基本前提(三点假设) 气泡和包围着气泡的液体之间存在着界面,在界面的气泡一侧存在着一层气膜,在界面液体一侧存在着一层液膜;气膜内气体分子和液膜内液体分子都处于层流状态,氧以浓度差方式透过双膜;气泡内气膜以外的气体分子处于对流状态,称为气体主流,任一点氧浓度,氧分压相等;液膜以外的液体分子处于对流状态,称为液体主流,任一点氧浓度、氧分压相等。 在双膜之间界面上,氧分压与溶于液体中氧浓度处于平衡关系 : 氧传递过程处于稳定状态时,
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