光合细菌转化槲寄生制剂乙醇提取浓度的研究.docVIP

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光合细菌转化槲寄生制剂乙醇提取浓度的研究.doc

光合细菌转化槲寄生制剂乙醇提取浓度的研究 【摘 要】目的 确定光合细菌(PSB)转化槲寄生制剂中槲寄生乙醇提取的最佳浓度。方法 以荷Lewis肺癌小鼠为模型,以抑瘤率、免疫指标、抗氧化指标为标准进行筛选。结果PSB转化槲寄生制剂的各项指标均优于单纯的槲寄生制剂,其中以PSB转化槲寄生制剂Ⅱ的各项指标为最佳。 结论 槲寄生 75%乙醇提取物所制光合细菌转化槲寄生制剂为最佳。 【关键词】槲寄生;工艺学;光合细菌;抗肿瘤槲寄生为桑寄生科槲寄生属植物 , 文献 [1,2] 报 道 , 槲寄生粗提物 、 槲寄生总生物碱具有抗肿瘤活 性 , 但因其中含有对人体有害的毒肽和小分子蛋白 质 , 限制了其应用 。 光合细菌 (PSB) 为一种有益菌 , 可以转化中药中的一部分成分 。 本文以荷 Lewis 肺 癌小鼠为模型 , 以抑瘤率 、 免疫指标 、 抗氧化指标为 标准对 PSB 转化槲寄生制剂中槲寄生乙醇提取浓 度进行了筛选 , 报告如下 。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 药材 : 槲寄生饮片 , 购自定州医药公司东亭批 发部 , 经山西医科大学高建平博士鉴定为桑寄生科 植物槲寄生 [Viscum coloratum(Kom.)Nakai] 的干燥 茎叶 。 1.1.2 试剂与药品 : 环磷酰胺制剂 (CP): 上海华联 制药有限公司出品 ( 批号 0402061), 临用前用生理 盐水稀释到 10 mg/ml。 PSB 制剂 :PSB 系紫色非硫菌 群 红 细 菌 属 的 球 形 红 细 菌 (Rhodobacter sphaeroides), 由山西大学光合细菌研究室分离鉴定 保藏 , 采用 Ormerod 培养基[3] , 光照厌氧培养 5 d, 浓 缩得 PSB 制剂 , 菌液含菌数 1.6×10 9 个 /ml; 槲寄生制 剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ:分别为 50%、75%、95%的槲寄生乙醇 提取物 , 制剂浓度以槲寄生原药材计为 0.5 g/ml; PSB 转化槲寄生制剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ:分别由 50%、75%、 95% 的乙醇槲寄生提取物 , 导入光合细菌后培养 5 d 得 PSB 转化槲寄生制剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。 制剂浓度以槲寄 生原药材计为 0.5 g/ml, 菌液含菌数 1.6×10 9 个 /ml。 1.1.3 动物与瘤株 : 动物 :C57/BL 小鼠 100 只 , 雌雄 各半 , 体质量 (18.0±1.0)g, 由山西医科大学动物中心 提供 。 瘤株 :Lewis 肺癌 , 中国预防医学研究院提供 , 山西大学光合细菌研究室传代保种 。 1.2 方法 1.2.1 瘤细胞接种 : 取新鲜无坏死的 Lewis 肺癌瘤 组织 , 无菌条件下匀浆 , 制成单细胞悬液 , 于 C57/BL 小鼠每鼠右侧前腋窝皮下接种 0.2 ml。 1.2.2 分组与给药 : 接种后 24 h 将动物按雌雄对半 随机分成 10 组 , 每组 10 只 。 荷瘤对照组 : 生理盐水 灌胃 , 每只 0.4 ml/d, 连续 15 d; 培养基组 :Ormerod 培养基灌胃 , 每只 0.4 ml/d, 连续 15 d; 环磷酰胺组 : Optimal level of ethanol for extraction of Mistletoe preparations transformed by photosynthetic bacteria QI Xiao -mei * , ZHENG Qing -hong, YANG Guan -e, ZHANG Zhao -ming. * School of Pharmaceutical Sciences, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China 【Abstract】 Objective To determine the optimal level of ethanol for extraction of mistletoe preparations trans- formed by photosynthetic bacteria (PSB). Methods The screening of ethanol level was performed using mice model of Lewis-lung tumor and based on the tumor inhibition rate, immune parameters and antioxidation parameters. Results All parameters for PSB transformed mistletoe preparations were better th

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