第二节_基因工程及其应用课件.ppt

多倍体育种： （1）原理： 基因工程及其应用 以往，治疗糖尿病的胰岛素是从动物胰腺中提取的，从100千克猪、牛等动物的胰腺只能提取3－4克胰岛素，治疗一个患者需宰杀40－50头牛，这种药物的造价就可想而知了。 ？如何让大肠杆菌生产人胰岛素？ 限制性内切酶（EcoRⅠ）作用过程 限制性核酸内切酶 主要是从 的一种酶。 识别双链DNA 分子的某种 ，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 形成两种末端 DNA连接酶的作用过程 运载体需要的条件： 　　⑴有1~多个限制酶切点 　　（2）导入基因能在受体细胞中复制、表达 　　（3）有某些标记基因，便于筛选 基因工程(gene engineering)的“四步曲” 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转抗寒基因的番茄 A：紫外光照射下的转绿色荧光蛋白的 Eustoma (Lisianthus) 花。 B：转没有绿色荧光蛋白的空质粒的花， 4.利用转基因改良植物的品质 含大量维生素的转基因玉米 抗癌抗衰老的紫色西红柿 转入维生素A合成酶基因的大米 转基因矮牵牛 转基因蓝玫瑰 转入荧光酶的转基因烟草苗 转入外源生长激素基因的“超级小鼠” 人治疗性抗体转基因奶牛 含有人凝血因子Ⅸ的转基因羊 乳腺生物反应器生产抗凝血酶Ⅲ蛋白 生长快、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 2、基因工程与药物研制 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 　　许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限，其价格往往十分昂贵。 　　微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内，让它们产生相应的药物，不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 练习使用EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 G 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ A 3’,5’-磷酸二酯键 3’端 5’端 3’端 5’端 磷酸二酯键 原核生物中分离纯化出来 特定的核苷酸序列 磷酸二酯键 粘性末端 平末端 基因的针线——DNA连接酶 （二）基因操作的工具 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。 磷酸二酯键 点击播放 两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来 DNA连接酶的缝合作用 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来， 注意：DNA连接酶可连接双链DNA中的DNA单链缺口，但不能连接单链DNA！ A A T T G C A A T T A A T T DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶的作用 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？ 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 DNA连接酶连接的是DNA骨架上的缺口，不是碱基间的氢键 例题.DNA连接酶的作用是： A.子链和母链之间形成氢键B.黏性末端之间形成氢键C.两个DNA末端间的缝隙连接D.A、B、C都对 C 对位训练 3.下列关于DNA连接酶作用的叙述，正确的是 （ ） A.将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸 二酯键 B.将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新 形成磷酸二酯键 C.连接两条DNA链上碱基之间的氢键 D.只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接 起来，而不能将双链DNA片段平末端之间进行