ARR对TFF3-Twist-NF-κB信号调节机制初探.pdf

·中文论著摘要· i st—NF—K ARR对TFF3-TwB信号调节机制初探 目的 为接头蛋白或支架蛋白可以介导GPCRs信号，并参与GPCRs和其他信号通路的 对话，如：NF．r,B信号通路，从而参与到其他信号通路的调节中。 转录因子NF．r,B普遍存在于真核细胞中，NF．r,B的激活受上游分子的精确调 控。p80片段是前期筛选的Ir．B上游调控子的一个分子，研究表明其激活可以使 IL-1诱导的NF-r．．B激活，启动靶基因转录，引起炎症反应。激活的NF。r．B调节依 负调节环路能够阻止NF．1cB过度和延长激活，对于限制炎症损伤至关重要。我们 活，并伴随Twist蛋白表达。 Factor 肠三叶因子3(Trefoil3，TFF3)是三叶因子家族的成员，是一种调节 性小肽。虽然TFF3最早是作为一种分泌性蛋白被发现，但近年研究提示TFF3与 该家族成员TFF2相似，都可能通过与受体蛋白／结合蛋白作用在细胞信号网络中 胞因子的生成。 Twist基因是最早在果蝇中发现的一种碱性螺旋．环一螺旋结构的转录因子， Twist基因5’端调节区域的启动子序列上游有NF．r．B结合位点，能与转录因 依赖的转录激活，调节转录。 下游炎性细胞因子的生成，其机制涉及Ir,．B磷酸化和部分降解，同时TFF3上调Twist 血磷脂酸(LPA)等诱导的不同上游调控的NF．r．B信号通路的调节，并因细胞类型、 激活状态、以及刺激因子的不同产生特异效应。但ARR家族成员对TFF3诱导的 NF．r,B信号通路的作用并不清楚，本研究意在探讨TFF3如何参与此类家族成员调 TFF3．Twist-NF．1cB信号通路的调节机制。 方法 l、构建实验相关质粒。 2、RT-PCR和Western Blot方法检测TFF3调节的ARRl、ARR2表达变化。 活性的调节。 4、免疫共沉淀验证TFF3诱导的ARRl、ARR2与Twist在体内的相互作用。 down实验验证ARRl、ARR2与Twist在体外的直接作用。 5、GST-pull 7、Western Blot方法检测干扰和过表达Twist，检测p80片段表达情况。 结果 1、TFF3上调ARRl、ARR2转录和翻译水平表达。 活性。 互作增强。ARRl和ARR2与Twist的互作可能受TFF3的差异性调节。 down实验证实ARRl、ARR2与Twist在体外直接互作。 4、GST-puU 在时互作减弱。 蛋白水平表达下调。 2 结论 上游特异调节子p80片段介导来实现。 关键词 ARRl；ARR2；NF一1(B；p80片段；TFF3；Twist 3 ·英文论著摘要· ofARRinthe of Therole Signalingpathway TFF3．Twist-NuclearFactor-KB ective obj Itwas thatARRasall orscaffold mediated protein protein reported adapter toinv