IL-2和IL-6对肝癌细胞表达VEGF-B的调节.pdf

中文摘要 IL．2和IL一6对肝癌细胞表达VEGF．B的调节 摘 要 目的：原发性肝癌(简称肝癌)是常见的消化系恶性肿 瘤，年死亡率居恶性肿瘤第二位，临床症状出现晚，症状出 现后大多已是中晚期，手术切除率低，预后差。传统的手术、 化疗、放疗因各自的局限性而不能达到满意的疗效，其原因 是肿瘤具有强大的生长和转移能力。肿瘤的生长和转移有赖 于血管新生，促进血管新生的关键因子是血管内皮生长因子 endothelialfactor 家族成员(vascular growth growth 已见于人神经系统肿瘤、乳腺癌、肾癌、大肠癌、肺癌等： 与大肠癌和肺癌的淋巴浸润和淋巴转移密切相关；可以调节 。肾癌中肿瘤血管的形成；在恶性神经胶质瘤血管生成过程 中，可能作为辅助因子而发挥作用；在乳腺癌中其主要作用 不是促进血管形成，而是与淋巴转移密切相关。VEGFs的表 复杂的生物学功能，可以通过影响细胞的粘附力、活动力、 血栓形成、肿瘤特异性抗原的表达及肿瘤细胞的增殖而影响 肿瘤的进展，其生物学特性与VEGFs的表达息息相关。本 研究采用逆转录聚合酶链式反应技术(reverse transcription chain polymerase mRNA的表达，探讨其对人肝癌细 肝癌细胞株前后VEGF—B 中文摘要 胞VEGF．B表达的调节，进一步明确肝癌侵袭及转移的机制， 为探讨肝癌新的治疗途径提供实验基础。 5％C02的饱和湿度的无菌培养箱、RPMI1640培养基中培养 细胞株复苏、传代、细胞呈稳定对数生长后，将培养液更换 为含0．1％胎牛血清的RPMI 1640培养基继续培养12小时， 以消除血清对细胞增殖的影响。然后分别更换为含有0．1、1、 作为实验组，各培养3、6、12、24小时，以加入等剂量的 一步法提取刺激前后总RNA，以VEGF．BmRNA为模板， 用RT-PCR技术测定刺激前后肝癌细胞VEGF．B基因表达， 以GAPDH作为内参照标准，分析刺激前后肝癌细胞株 VEGF．B 软件进行分析，P0．05具有统计学意义。 结果 1 IL．2对肝癌细胞株SMMC．7721表达VEGF—BmRNA的影 响。 以不同浓度的IL一2刺激后，与对照组相比，VEGF．B 的扩增产物电泳条带亮度呈不同程度的减低；各实验组 VEGF．B mRNA的 mRNA的表达量均低于对照组VEGF．B 在同一浓度下，不同作用时间的VEGF—BmRNA表达量无 VEGF．B mRNA的表达，并在0．1～20％g／L范围内，其抑制 中文摘要 作用呈浓度递增性，尤其当浓度1001．tg／L时，抑制作用最 明显，但与作用时间无明显关系。 2IL．2对肝癌细胞株BEL．7402表达VEGF．BmRNA的影 响。 以不同浓度的IL．2刺激后，’与对照组相比，VEGF—B 的扩增产物电泳条带亮度呈不同程度的减低；各实验组 VEGF—B mRNA的表达量均低于对照组VEGF．BmRNA的 VEGF—B mRNA的表达无统计 O．1“g／L与1pg／L实验组之间VEGF．B 学差异(P--0．074)。各实验组同一浓度下不同作用时间 VEGF．B mRNA的表达量无明显变化。可见，IL．2抑制肝 VEGF—B 癌细胞株BEL．7402 mRNA表达，但是与作用时间 无明显关系。 3IL．6对肝癌细胞株SMMC．7721表达VEGF．BmRNA的影 响。 以不同浓度的IL．6刺激后，与对照组相比，除1