E-钙粘附素%2fβ-连环素复合体对孕鼠神经干细胞迁移和归巢的影响.pdf

摘要 摘要 cordin 脊髓损伤(Spinaljury，SCI)为中枢神经系统的严重创伤，是造成瘫 痪的主要病因。传统观点认为，SCI是不可修复和再生的，近年来大量研究发现 stem 神经干细胞(Neuralcells，NSCs)具有多向分化潜能，在特定的环境中对 神经系统缺血、损伤、变性等原因造成的功能障碍有明显的修复作用。脊髓损 伤后再生能力受限主要是因为缺乏诱导、促进神经再生的微环境，而非损伤的 轴突本身不具有再生能力。本实验就是研究一些细胞因子，主要是一些粘附分 子(adhesionmolecules，AM)对NSCs迁移和归巢的影响。 的时候相互依存，所以经常把它们放在一起研究。E．cad属于钙粘素家族中一 员，广泛存在于各类上皮细胞中，是一种钙依赖性粘附分子，主要介导同型细 胞间的粘附反应，并起细胞骨架作用，维持组织结构的完整性和上皮极性。cat 是一组具有相似结构的胞内糖蛋白家族，分为4大类，即a．cat、B．eat、丫． 附，处在E?cad／cat复合体的核心位置，因而可能是E．cad功能的调节位点。 本实验采用实时定量PCR测定孕鼠神经干细胞中E—cad和D—cat在神经干细 胞原代和传代4—6代后的含量变化，并结合流式细胞技术测量p—cat相应的变 化，从而判断粘附分子对神经干细胞的传代有何影响。 目的：本课题采用RT-PCR测量神经干细胞在原代和传代4．6代后E．cad和 B．cat的表达量是否有所变化，同时在蛋白表达水平借助流式细胞技术测量B—cat 相应的表达变化，进而判断这两种粘附分子在神经干细胞的传代过程中有何影 响，为以后神经干细胞的迁移、植入的研究打下基础。 方法：孕鼠神经干细胞若干，先进行Ncstin染色，证明神经干细胞未分化， 量检测，剩余的继续培养，保持传代不分化，传代4-6代，即2周左右，再一次 重复前面的操作，统计前后的结果有无差别。 明显增多，且差别具有统计学意义(P0．05)；相应的流式细胞技术测量B_cat 的含量变化，我们发现p—cat的含量也明显增多，且差别同样具有统计学意义 摘要 (PO．01)。 结论：粘附分子E—cad和P_cat在神经干细胞的传代过程中含量发生明显 变化，我们推测它们在神经干细胞原代的保持中起到一定的作用。 关键词：E-cad、P—cat、E-cad／cat复合体、神经干细胞、传代。 Ⅱ ABSTRACT central cord isseveretraumaofthe nelvous Spinalinjury(SO)，which system，is a oause viewisthatSCIcannotbe and major ofparalysis．Traditional repaired in recent a numberofstudiesfoundthatneulalstemcells regenerated．Butyearslarge with differentiationa aclearrole multiple potential，inparticularenvironment,make onthenervous andothercaus鹤of systemischcmia,injury,degenerationdysfunction in afIer cord islimited the