在线样品提取LC-MSMS进行蜂蜜中喹诺酮残留的检测分析.docVIP

在线样品提取LC-MS/MS进行蜂蜜中喹诺酮残留的检测分析 简介： 全球食品市场竞争越来越激烈，同时相应的花费也越来越昂贵。分析检测需求的高通量、高灵敏度和好的重现性也在日益增长。于是，一种新的检测方法应运而生，它可以替代传统的、耗时的固相萃取（SPE）样品提取法，这就是将自动的在线提取与串联质谱进行结合。 喹诺酮，包括氟喹诺酮，是一类合成性抗菌素，广泛用于多种感染性疾病的防治欧盟法规规定最低允许限量（MRPL）Thermo Scientific Turbo Flow技术使得样品预处理的时间大大缩减，同时也消除了分析过程中蜂蜜类复杂样品基质所带来的干扰。 目标： 开发出一种使用Turbo Flow? 技术进行自动样品制备，对蜂蜜中12种氟喹诺酮和4种喹诺酮进行定量分析的灵敏的、可再现的LC-MS/MS方法。 实验： 样品制备 称取1g蜂蜜样品，加入1mL水充分混匀，经0.22μm聚醚砜膜注射过滤，过滤后的样品直接注入HPLC样品瓶。 使用标准储存溶液进行样品稀释，制备不同浓度水平的标准溶液进行检测分析。 12个样品总的制备时间是40分钟。 Turbo Flow? 方法条件 系统： Thermo Scientific Aria TLX-1 controlled by Aria? software (图1) 在线提取： Turbo Flow Cyclone 50 x 0.5 mm 流动相A： 水（含0.1% 甲酸） 流动相B： 乙腈（含0.1% 甲酸） 流动相C： 水（含10mM甲酸铵） 流动相D： 乙腈/异丙酮/丙酮（4：3：3 V/V/V） 进样体积： 90μL 3．HPLC方法条件 分析柱： Thermo Scientific Hypersil GOLD 2.1 x 50 mm, 3 μm （40° C） 溶剂A： 水（0.5%甲酸） 溶液B： 甲醇/乙腈（0.5%甲酸，1：1 V/V） 图1 Aria TLX-1 controlled by Aria? 软件 4. MS条件 Thermo Scientific TSQ Quantum Ultra AM三重四极杆质谱仪°C 鞘气压(N2)： 40 units 辅助气压(N2)： 35 units 毛细管柱温度： 325°C 碰撞气体（Ar）： 1.5mTorr Q1/Q3峰分辨度： 0.7 u (单位分辨质量)Xcalibur软件提供的MS方法。 图2 MS方法中的SRM离子对和其他条件 表1 16种被分析物的相关参数条件 被分析物 母离子（m/z） 子离子（m/z） 碰撞能量（V） 管透镜电压（V） 1. 萘啶酸 233.064 104.143 40 78 215.020 15 78 187.025 25 78 2.恶喹酸 262.032 130.106 33 82 244.012 19 82 3.氟甲喹59 217.049 22 59 245.011 16 59 5.吡哌酸诺氟沙星依诺沙星环丙氟哌酸洛美沙星达氟沙星75 340.089 24 75 11.恩诺沙星氧氟沙星马波沙星70.067 34 66 72.073 22 66 276.064 14 66 320.022 14 66 14.氟罗沙星370.094 269.023 27 112 326.061 19 112 15.沙氟沙星298.979 28 105 342.078 18 105 367.878 22 105 16.双氟沙星400.107 299.009 29 75 356.017 20 75 结果讨论： 食物样品本身基质比较复杂，在进行检测之前往往需要一个较长的样品预处理过程。Thermo Scientific Aria TLX-1系统带有的Turbo Flow技术可以减少样品制备的时间，用该方法为LC-MS/MS准备一批样品仅仅只需40min，而如果使用固相萃取（SPE）法平均需要6小时。即使是处理像蜂蜜这样的复杂样本，TLX-1系统除了减少准备时间，还能够消除一些可能的干扰因素，而且谱图中信噪比较