生物工业分析 教学课件 作者 罗建成 主编 李晓华 主审 第七章.ppt

尚辅网 尚辅网 尚辅网 气相色谱分析 　　（3）热稳定性好，有一定的机械强度，不易破碎。 （4）对担体粒度的要求，一般希望均匀、细小，这样有利于提高柱效。但颗粒过细，使柱压降增大，对操作不利。一般选用40～60目，60～80目或80～100目等。 选择担体的大致原则为： ①当固定液质量分数大于5％时，可选用硅藻土型（白色或红色）担体。 ②当固定液质量分数小于5％时，应选用处理过的担体。 ③对于高沸点组分，可选用玻璃微球担体。 ④对于强腐蚀性组分，可选用氟担体。 尚辅网 气相色谱分析 　　固定液 （1）对固定液的要求。 a．挥发性小，在操作温度下有较低蒸气压，以免流失。 b．热稳定性好，在操作温度下不发生分解。在操作温度下呈液体状态。 c．对试样各组分有适当的溶解能力，否则易被载气带走而起不到分配作用。 d．具有高的选择性，即对沸点相同或相近的不同物质有尽可能高的分离能力。 e．化学稳定性好，不与被测物质起化学反应。 尚辅网 气相色谱分析 　　（2）固定液的分离特征。 　　在气相色谱中常用“极性”来说明固定液和被测组分的性质。由电负性不同的原子所构成的分子，它的正电中心和负电中心不重合时，就形成具有正负极的极性分子。如果组分与固定液分子性质（极性）相似，固定液和被测组分两种分子间的作用力就强，被测组分在固定液中的溶解度就大，分配系数就大，也就是说，被测组分在固定液中溶解度或分配系数的大小与被测组分和固定液两种分子之间相互作用力的大小有关。 分子间的相互作用力包括静电力、诱导力、色散力和氢键力等。 尚辅网 气相色谱分析 　　（3）固定液的选择 　　a．分离非极性物质，一般选用非极性固定液，这时试样中各组分按沸点次序先后流出色谱柱，沸点低的先出峰，沸点高的后出峰。 b．分离极性物质，选用极性固定液，这时试样中各组分主要按极性顺序分离，极性小的先流出色谱柱，极性大的后流出色谱柱。 c．分离非极性和极性混合物时，一般选用极性固定液，这时非极性组分先出峰，极性组分（或易被极化的组分）后出峰。 d．对于能形成氢键的试样一般选择极性的或是氢键型的固定液，不易形成氨键的先流出，最易形成氨键的最后流出。 尚辅网 气相色谱分析 　　（4）进样时间和进样量 进样速度必须很快，一般用注射器或进样阀进样时，进样时间都在一秒钟以内。 　　液体试样一般进样0.1～5μL。气体试样0.1～10 mL。最大允许的进样量，应控制在峰面积或峰高与进样量呈线性关系的范围内。 　　（5）气化温度 　　进样后要有足够的气化温度，使液体试样迅速气化后被载气带人柱中。在保证试样不分解的情况下，适当提高气化温度对分离及定量有利。一般选择气化温度比柱温高30～70℃。 尚辅网 气相色谱分析 　二、操作步骤 　　启动仪器前先检查气路，电路是否按照要求接好，通入载气，先开钢瓶阀，再开减压器，调节针形阀，控制载气流速度使之符合操作条件。 　　启动、恒温，开启总电源开关，再依次打开柱槽、进样器、热导温控开关，将柱温、汽化室、检测器温度调节旋钮转至要求的位置，加热至一定时间后，用温度测量旋钮分别检查三处温度是否符合要求，若温度已符合要求，再检查载气流速是否正常。 尚辅网 气相色谱分析 　　调整基线衰减到要求值，打开热导开关，将桥电流调节旋钮旋到电流要求值，同时打开数据处理系统，击“查看基线”，再击“基线调零”。此时，基线回到“0”位置，仪器稳定后，基线应在“0”位置，若不在，击“基线调零”，选择适当的时间值电压值和分析方法及其他选项，待基线走直后，即可进行分析。 　　进样，用微量进样器注入待测样品。 　　关机，测量完成后，将桥电流调节旋钮转到最小位置，关闭热导电源，柱槽，进样器，热导温控开关，再关掉总电源，待温度下降后，关断载气。 尚辅网 气相色谱分析 第三节　色谱分析 　　一、定性分析 　　1．根据色谱保留值进行定性分析 　　其应用仅限于当未知物通过其它方面的考虑（如来源，其它定性方法的结果等）已被确定可能为某几个化合物或属于某种类型时作最后的确证；其可靠性不足以鉴定完全未知的物质。一般宜采用仅与柱温有关，而不受操作条件影响的相对保留值r21作为定性指标。 　　对于较简单的多组分混合物，如果其中所有待测组分均为已知，它们的色谱峰也能一一分离，则为了确定各个色谱峰所代表的物质，可将各个保留值与各相应的标准试样在同一条件下所测得的保留值进行对照比较。 尚辅网 气相色谱分析 　　对色谱图上出现的未知峰进行鉴定。这时，首先充分利用对未知物了解的情况（如来源，性质等等）估计出未知物可能是哪几种化合物。再从文献中找出这些化合物在某固定相