生物物质分离工程（ 第二版） 教学课件 作者 严希康 主编 第18章色层分离法.ppt

尚辅网 尚辅网 尚辅网 18.5.5 聚焦色层分离法 尚辅网 18.5.6 离子交换色层分离法 （１）原理 （２）特点 （３）介质 （４）洗脱方式 （５）影响线性梯度洗脱分离特性的因素 （６）应用它们的相态。 尚辅网 18.5.6 离子交换色层分离法 尚辅网 18.5.6 离子交换色层分离法 尚辅网 18.5.6 离子交换色层分离法 尚辅网 18.5.7 凝胶过滤色层分离法 尚辅网 18.5.7 凝胶过滤色层分离法 （１）原理 尚辅网 18.5.7 凝胶过滤色层分离法 　 见教材 （２）凝胶过滤介质及其选择 尚辅网 18.5.7 凝胶过滤色层分离法 （３）应用 尚辅网 18.5.8 正相与反相层析 （１）简介　 （２）反相层析对分离物要求 ①弱酸性、弱碱性化合物可调节ｐＨ使该化合物处于不解离状态。 ②两性物质可以加入反离子使之成为中性离子对，再进行层析。 ③有些离子，可以使它们先变成中性配合物，然后再层析，如金属离子。 尚辅网 色层分离法的产生和发展 2 色层分离的有关术语 3 概述 1 18 色层分离法 色层分离过程理论 4 各类不同分离机制的色层分离法介绍 5 层析的放大 6 尚辅网 18.1 概述 色层分离是一组相关技术的总称，又叫色谱法、层离法、层析法等，是一种条件温和、能分离物化性能差别很小的一组化合物的重要分离技术。 尚辅网 18.2 色层分离法的产生和发展 1 2 沿革 色层分离中的基本概念及其分类 3 色谱展开技术 尚辅网 18.2.1 沿革 气相和液相特别是液相色层分离技术，如分配色谱、离子交换色谱、疏水色谱、凝胶色谱、亲和色谱等，已成为有机化学、生物化学、蛋白质等方面的一项重要分离技术。 尚辅网 色层分离这一术语，最早应用于有色色素的离析并沿用至今。它是基于当含有被分离物质的料液渗滤通过由吸着剂粒子涂铺的层（薄层层析）或填充的管子（柱层析）时，对混合物各组分产生选择性的阻滞作用。 18.2.2 色层分离中的基本概念及其分类 尚辅网 18.2.2 色层分离中的基本概念及其分类 尚辅网 18.2.2 色层分离中的基本概念及其分类 尚辅网 18.2.3 色谱展开技术 尚辅网 18.2.3 色谱展开技术 （１）洗脱分析法 尚辅网 18.2.3 色谱展开技术 （２）前流分析法 尚辅网 18.2.3 色谱展开技术 （３）顶替分析法 尚辅网 18.2.3 色谱展开技术 尚辅网 18.3 色层分离的有关术语 1 2 平衡关系 局部平衡定律 尚辅网 18.3.1 平衡关系 在色层分离过程中，所有的溶质都被同一流动速度的移动相运送，并且可逆地向固定相迁移，由于在固定相上面它们所消耗的时间不同，所以其总的迁移速率各不相同。 尚辅网 通常溶质在固定相中的浓度是它在流动相中浓度的函数，一般认为： 18.3.2 局部平衡定律 但是在给定温度下，可简化为： 尚辅网 18.3.2 局部平衡定律 尚辅网 18.4 色层分离过程理论 1 2 塔板理论 色层分离的连续描述 尚辅网 以下的假设是大多数塔板理论模型所共有的。 ①吸附过程是热力学上可逆的。 ②在相间，溶质的质量传递阻力可以忽略不计 ③洗脱液连续通过板，流出体积为Q ④在相邻板之间它们没有返混。 ⑤平衡等温线是线性的（Kｄ＝常数）： ⑥ 18.4.1 塔板理论 尚辅网 它的图解表示被称为是穿透曲线（图18.10）。 （１）参数的估计———N的判定　 （２）等理论板高度的概念和效率 （３）不平衡和区域扩展 18.4.1 塔板理论 尚辅网 18.4.1 塔板理论 尚辅网 18.4.2 色层分离的连续描述 （１）平衡模型 （２）速率理论 尚辅网 18.4.2 色层分离的连续描述 尚辅网 18.5 各类不同分离机制的色层分离法介绍 1 2 吸附色层分离法 疏水作用色层分离法 3 4 金属螯合色层分离法 共价作用色层分离法 5 6 聚焦色层分离法 离子交换色层分离法 尚辅网 18.5 各类不同分离机制的色层分离法介绍 9 10 聚焦色层分离法 离子交换色层分离法 11 12 拟似移动床型色层分离法 灌注色层分离法 7 8 凝胶过滤色层分离法 正相与反相层析 尚辅网 吸附色层分离法是利用吸附剂对组分的吸附能力的差别进行分离的，用来填充柱的物质包括无机吸附剂和有机吸附剂。 18.5.1 吸附色层分离法 尚辅网 18.5.2 疏水作用色层分离法 （１）原理 （２）首要条件 （３）影响疏水作用的参数 （４）在蛋白质分离、纯化上的应用 尚辅网 18.5.3 金属螯合色层分离法 尚辅网 18.5.4 共价作用色层分离法 （１）简介 （２）过程阶段 （３）应