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Xfect介导重组质粒pEGFP_C2_L_省略_3高效转染Vero细胞的方法及.pdf
生物技术通报
BIO TE CHN OLOG Y B ULLETIN 20 11 1
Xfect pEGFP-C2/LAT-ORF3
Vero
1 2
薛礼长 杨慧兰
1 2
( , 510006; , 510010)
: 旨在用 X fect试剂介导重组质粒 pEGFP-C2 /LAT-ORF3转染 V er 细胞, 以期获得转染效率较高的方 , 并检测
目标片段的表达, 从而为进一步研究HSV-2 LAT 基因及其 ORF3 片段的生物学功能奠定基础用 X fect试剂介导重组质粒
pEGFP-C2 /LAT-ORF3转染 Ver 细胞, 48 h 后观察荧光表达情况, 并计算不同转染方 分别在有无血清及质粒与 Xfect P lym er
比例不同时的转染效率用 RT-PCR 检测 ORF3片段在 Ver 细胞中的表达结果显示, 采用贴壁转染 , 在有血清及质粒与
X fect P lym er比例为 5 g/2 L 时转染效率较高; RT-PCR 可以获得目的条带, 证明ORF3片段在 Ver 细胞中得到表达本试
验获得的优化条件可以显著提高Xfect P lym er对Ver 细胞的转染效率; 以绿色荧光蛋白作为标签鉴定目的基因在细胞中表
达的方 切实可行
: Xfect 转染效率 Ver 细胞 绿色荧光蛋白
Establishment an Optim ization ofEukaryotic Expression
Plasm i pEGFP-C2/LAT-ORF3 Transfecte into
Vero Cell by Xfect asM e iation
1 2
Xue Lizhang Y ang Hu ilan
1
( School of BiologicalScience andEngineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006;
2
Guangzhou GeneralHosp ital of GuangzhouM ilitary Co and, Guangzhou 510010)
Abstrac:t In rder t btain h ighly transfecti n efficiency and detect the expressi n f target fragm en t, the rec mb inan t plasm id
pEGFP-C2 /LAT-ORF3 was transfected int Ver cells by X fect as m ed iati n. The rec m binant plasm id pEGFP-C2 /LAT-ORF3 w as
transfected int V er cells m ediated by Xfect. A fter 48 h urs bserving expressi n f the rec mb inant plasm id in the cells by flu res-
cence m icr sc pe, the transfecti n efficiencyw
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