肿瘤免疫学检验0903（沈霞）.ppt

肿瘤标志物临床应用指南_质量规范 上海交通大学医学院附属新华医院 沈 霞 一.概述 恶性肿瘤是目前危害人类健康的主要疾病之一。在传染病得到控制的国家，恶性肿瘤已上升到第一位或第二位死亡原因。据WHO 2007年统计全球有790万人死于癌症,其中72%以上发生在中、低收入的发展中国家根本原因是没有很完善的检测流程,强调了实验室检测在早诊早治中的重要性. 2008年统计我国现有癌症病人200万人，每年新发病例170万,死亡130万。肿瘤的预防、诊断和治疗是目前医学领域研究的重大课题 亚洲癌症大爆炸 在以中国为代表的亚洲国家: 农村城市化、 人口老龄化、 城市现代化、 环境污染化、 生活方式不良化、 都造成癌症发病率和死亡率的上升 肿瘤标志物的分类 根据标志物的本质，将其分成蛋白质类、糖类、脂类、酶类、激素类和多胺类 根据标志物的存在部位 ：体液肿瘤标志物和细胞肿瘤标志物 根据TM检测技术的发展 1.放射免疫分析（RIA） 2.免疫荧光测定（FIA）荧光原位杂交（FISH） 3.免疫组织化学（IHC）、酶联免疫吸附试验（ELISA） 4.借助于微粒子戴体的微粒子酶免分析（MEIA) 5.稀土元素标记的时间分辨荧光分析（TRFIA） 6.化学发光免疫分析（CLIA）、电化学发光免疫分析（ECLIA） 7.微阵列(microarrays)检测 8.质谱分析(mass spectrometry)技术 吖啶酯标记的化学发光免疫分析仪 检测原理：ACS180 吖啶酯（acridinium ester,AE)可通过化学反应 直接标记抗体或抗原,标记的结合物即可用于 化学发光免疫测定。它是一个三环的有机化合 物，容易氧化，且氧化反应无需催化剂。在 碱性介质中氧化时,经过中间体产生一个电激 发的甲基吖啶酮,当它回到基态时释放出光子. ， 过氧化物酶标记的化学发光分析仪 检测原理: Vitro ECI 采用增强化学发光法:HRP-luminol CLIA (enhanced chemiluminescence immunoassay) 发光剂(luminol)经快速催化与过氧化氢发生 氧化分解反应,转变为激发态,随即释放光子. Vitro ECI的增强剂选择的是三氯四羟乙铣苯 胺(3CI4HA),在氧化过程中起催化作用,并使 生成的信号循环往复而很慢衰减,提高了光信 号强度和发光持续时间.灵敏度0.1ng/ml;特异性 99.9%;CV=5%. ， 碱性磷酸酶标记的化学发光分析仪 检测原理:Access or Immulite 碱性磷酸酶催化dioxetane磷酸酯引起化学发 光反应. dioxetane磷酸酯是一种碱性磷酸酶 的底物,简称AMPPD,是高度灵敏发光系统。 采用成熟的单克隆抗体技术,保证稳定性,磁性 微粒作为固相载体,大分子物质采用夹心法,小 分子物质采用竞争法或抗体捕获法进行分析。 检测灵敏度为0.002uIU/ml; ARCHITECT- i2000检测技术Chemiluminescent Microparticle ImmunoAssay化学发光微粒子免疫分析 二.肿瘤标志物在临床上用途 1. 大肠癌 大肠癌包括结肠癌和直肠癌（carcinomo of colon and rectum）。结肠癌和直肠癌均为腺癌， 结肠癌比直肠癌的发病率通常高一倍。饮食因素 对结—直肠癌的发病有着重要的影响，高脂肪 饮食者可以增加患结直肠癌的机会达2倍左右。 其他因素与特殊人群的结、直肠癌发病有关。如： 溃疡性结肠炎，家族性息肉综合征和与息肉无关 的家族性结肠癌。这表明某些结、直肠癌的发病 与家族遗传因素有一定的关系。 主要标志物： (1)CEA （Carcinoembryonic antigen, CEA） 由肿瘤细胞分泌CEA进入血循环,血清CEA异常增高。 CEA水平在10ug/L以上时即 X倍于参考值上限，结 直肠癌有35%异常，而对较小和早期肿瘤较难检测 出阳性。CEA对结、直肠癌具有较高的特异性，被 视为评价结、直肠癌临床状态的可靠试验。 60ug/L仅见于结、直肠、胃和肺癌。 (2)?CA2