系统素量子点生物荧光探针的构建及特性.pdfVIP

第32卷第2期 桂林理工大学学报 VOL32No．2 ofGuilin of Mav2012 2012年5月 Journal UniversityTechnology 文章编号：1674—9057(2012)02—0228一05 doi：10．3969／j．isstr 系统素量子点生物荧光探针的构建及特性 ‘‘杜甫佑1，刘虎威2 (1．桂林理工大学化学与生物工程学院，广西桂林541004；2．北京大学化学与分子工程学院，北京100871) 摘要：采用碳二亚胺法偶联系统素多克隆抗体和水溶性CdSe／ZnS量子点，制备了系统素量子点免 能力近似；体系中硼酸缓冲液的pH为9．0时，antiSys·CdSe／ZnS量子点荧光探针溶液的荧光强度最 的荧光强度明显增加；当体系中含有l％BSA时，antiSys-CdSe／ZnS溶液的稳定性和荧光强度最佳。 关键词：系统素；抗体；纳米量子点；生物探针 中图分类号：Q946．885；0657．3 文献标志码：A 酚氧化酶№。、多聚半乳糖醛酸酶H】、氨基酸代谢 0引言 酶”J，系统地调控和活化20多种防御基因一1，能 植物多肽激素与其他小分子植物激素(如生 进行长距离的信号运输¨训等。由于系统素在植物 长素、脱落酸、茉莉酸、细胞分裂素、赤霉素、 体中的含量极低，且在植物体中的分布随着环境 乙烯和油菜素内酯等)一样，是非常重要的一类 及外界刺激的变化而变化，因而，分离、分析植 植物激素，参与了植物的生长和发育等不同方面 物体中的系统素仍面临很多的挑战‘1卜12J，尤其是 的调控，包括防御反应、细胞增殖、自交不亲和 原位在线检测植物体中的系统素。建立原位在线 的识别、分生细胞的组织和组织脱落等¨。1。目 检测植物体中的系统素对研究植物多肽激素分子 前已经发现的植物多肽激素有系统素、植物硫肽 作用机理具有非常重要的作用。 素、快速碱化因子和早期结瘤素等旧J。 量子点(quantumdots，QDs)是一种直径为l一 10 系统素(systemin，Sys)是目前研究的最全nm的球形半导体纳米晶体，具有优良的光谱特 面、最深入的一类植物多肽激素，于1991年被 征和光化学稳定性。作为荧光标记物具有激发光 Pearce等H-首次从被昆虫攻击的番茄叶中分离和 谱单一、斯托克斯位移较大、荧光谱线窄、发光效率 鉴定。研究表明，系统素是植物体在外界伤害刺 高、发光颜色可调、可多色联合标记，且光稳定性 激下从其前体蛋白(pmsystemin，由200个氨基酸好、抗漂白能力强、易于合成和修饰等特性，在生物 组成)C末端剪切下来的多肽化合物，含有18个标记、活体成像、生物分析检测、环境分析检测、药 氨基酸，其氨基酸序列为AVQSKPPSKRDPPK-物筛选等方面得到了广泛的应用¨“”J。量子点与 MQTD。除根部外，植物体其他部分都含有系统抗体偶联可制备量子点免疫荧光探针，从而实现目 素。作为系统性防御反应的信号分子，系统素在 标物的原位在线检测或原位成像超灵敏分析。将 很低浓度下(fmoL／株)就可诱导植物体全身的防水相法合成的水溶性量子点通过碳二亚胺法与牛 御反应。它能够诱导和合成蛋白酶抑制剂”]、多 血清白蛋白(BSA)或其对应的抗体偶联，构建纳米 收稿13期：201l一11一14 基金项目：国家自然科学基金项目20905005)；中国博士后科学基金特别资助项目(201003008) 作者简介：杜甫佑(1975一)，男，lq士，副教授，分析化学专业，fydu@glite．edu．cn。 万方数据 第2期 杜甫佑等：系统素量子点生物荧光探针的构建及特性 229 荧光探针。