组织处理仪在临床超微病理样品制备中的应用.pdfVIP

·400· JDiagPathol，June2014，V01．21，No．6 doi：10．3969／j．issn．1007·8096．2014．06．020 ·技术交流· 组织处理仪在临床超微病理样品制备中的应用 钟秀容，陈莲云 (福建医科大学基础医学院病理学系电镜室，福州350004) [关键词]组织处理仪；透射电镜；生物样品制备 [中图分类号]R446．8[文献标识码]B[文章编号]1007—8096(2014)06—0400—02 电镜用于临床病理标本的诊断，以往采用传统的手工法 2结果 进行制样，不仅费时费力、试剂消耗量大、且人为因素多、结 实验组与对照组标本的包埋块修块时感觉韧性好，半薄 果不稳定，出病理报告时间也长。近年来，许多单位使用组 切片无破洞，超薄切片连续；电镜下见细胞膜性结构清晰，反 织处理仪进行电镜样本制备‘1’2J，其过程是按照手工法的步 差良好(图1，2)。用组织处理仪制备的样品未见因为试剂 骤进行，且对每一步骤的实验条件如振动频率、时间和温度 漂洗不尽而造成锇酸、醋酸铀沉淀，以及组织脱水不彻底造 未做详细设定，这样常会出现漂洗及脱水不净造成包埋效果 成浸透不良、难以切片的现象；且经过大批量标本使用表明， 不稳定。故我们考虑仪器本身的特点及影响电镜制样效果 用组织处理仪制备样品的结果比传统手工制样法更稳定，人 的关键因素，结合手工制样经验，摸索出一套适于临床病理 为影响因素少。 标本的电镜组织处理仪的制样程序，后期再使用微波辅助聚 3讨论 合样品¨o，达到快速制样的目的，其包埋效果好，利于临床 组织处理仪的最大优势是可减轻繁琐的人工操作，且包 快速诊断。 埋效果稳定。要想取得理想的包埋效果要考虑到生物电镜 1材料与方法 样品制样的关键步骤并结合仪器本身的特点，利用其优势， 1．1材料实验动物心肌及临床肾穿刺组织和肌肉活检组 在不足处加以补救，设定出合理的实验程序如更换液体的次 织等。 数、振动频率、时间及温度才行，否则按手工方法也难以得到 1．2方法 满意结果。 1．2．1操作步骤组织处理仪制样实验组：将标本登记标 3．1 EM TP组织处理仪的主要特点 仪器的转盘上共有 号，放入专用的4格篮子中，将几个篮子装成串后，移到 24个试剂瓶，每瓶工作条件(如振动频率、时间及温度)可据 LeicaEM TP组织处理仪中，按如下步骤，设定相应的实验条 需要单独设定，输入存储器中预存，实验时直接调用程序，方 件程序(共24步)进行补充前固定、漂洗、后固定、漂洗、脱 便省时。试剂瓶每瓶的最大容量只有20ml，实际工作时试 Hz／ 水及半浸透过程：①3％戊二醛1次，振动频率为l 剂通常只能装12ml左右。因液体量较少，可缓冲的范围也 60 min／