有机硅树枝状大分子涂层毛细管电泳柱的制备及性能评价.pdfVIP

第36卷 分析化学(FENⅪHuAxuE)研究报告 第2期 of 167—17l 2008年2月 Chine∞Joumal AnalyticalChemis时 有机硅树枝状大分子涂层毛细管电泳柱的制备及性能评价 寿崇琦+1 邢希学2 康杰分1 张志良3’宋南京1 尚盼1 1(济南大学化学化工学院，济南250022) 2(山东省产品质量监督检验研究院食品化工部，济南250100) 3(山东轻工业学院分析检测中心，济南250100) 摘要利用化学键合的方法，将合成的以四甲基四乙烯基环四硅氧烷(D。”)为核的聚碳硅烷类有机硅树枝 状大分子涂敷到毛细管电泳柱的内壁，并用其来分离碱基及其衍生物。由于树枝状大分子球状立体，能够在 毛细管内壁形成一层牢固、具有一定厚度的涂层，该涂层能有效抑制碱性物质的吸附。显著提高分离柱效，柱 效达到3．80×104plate8／m；树枝状大分子的骨架为硅碳键，性能稳定，耐酸碱，形成涂层牢固。迁移时间重现 性能良好。实验进一步讨论了涂敷次数对分离效果的影响，结果表明，二次涂敷的分离效果最好，分离柱效达 到14．79×104plates／m。 关键词有机硅树枝状大分子，毛细管电泳涂层柱，碱基及其衍生物 1 引 言 嘌呤碱是许多药物的中间体，其衍生物如腺苷、6．糠氨基嘌呤也是许多药品的重要组成部分。现在 许多领域，例如临床诊断，药理DNA损坏化验等，均需要一种快速、便宜、准确的分离分析方法¨“J。碱 基及其衍生物的分离大多采用高效液相色谱。而高效毛细管电泳用于碱基分离最近几年才见报道”1。 由于碱基及其衍生物在碱性环境下显电负性，以往主要采取在碱性缓冲溶液下进行分离，一般方法是采 用阳离子表面活性剂使电渗流的方向反转，从而达到有效分离负离子的目的【6．7J。但是表面活性剂的 加入，容易造成电渗流不稳定，分离重现性能不好的缺点。而碱基及其衍生物在酸性的条件下呈现正电 性，si—OH电离对碱基的吸附作用易造成峰拖尾、分离柱效下降、迁移时间延长等缺点。在酸性条件 下分离可以采取极限pH值法，但是较低pH值下，碱基衍生物核苷等极易分解，使分离失去意义。 目前，抑制碱性物质在毛细管内壁的吸附，主要采用在毛细管内壁键合一层聚合物来屏蔽硅羟基， 抑制其电解，减少吸附MJ。传统的涂层一般采用线型的聚合物，但是线型聚合物粘度往往随着浓度的 增加而增加，对毛细管进行涂敷时，浓度过高，粘度太大，很容易造成涂敷不均，甚至堵塞毛细管；而浓度 太小，涂层太薄，涂敷不理想归卅¨。本实验采用2，4，6，8一四甲基-2’，4’，6’，8’-四乙烯基环四硅氧烷 分子，采用化学键合涂敷的方法将其涂于毛细管内壁。树枝状大分子特有球状树冠结构，克服线型聚合 物的粘度随浓度增大而增大的缺点，易在毛细管电泳柱内壁形成稳定的、立体式涂层。该涂层在pH值 3—8能有效抑制Si—旬H的电离对碱性物质的吸附，有效控制电渗流，对腺嘌呤、腺苷、6一糠氨基嘌呤 3种物质具有较好的分离效果。 2 实验部分 2．1试剂和仪器 2，4，6，8．四甲基．2’，47，6’，8’．四乙烯基环四硅氧烷(D4Ⅵ，上海建橙工贸有限公司)；甲基氢二氯硅 2007旬5JD7’收稿；200r7J09-24接受 本文系济南大学搏士基金启动项目(No．B0503) 宰 E·眦ij：shou。q@163．嗍 万方数据万方数据 168 分析化学 第36卷 余试剂均为分析纯。 毛细管(河北永年锐沣色谱器件有限公司)，内径75 cm，有效长度为50 pm，总长度55 cm；宾达 1229型高效毛细管电泳仪(北京新技术应用研究所)；UV-254nm检测器；N2000双通道色谱工作站(浙 江大学