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.分解纤维素的微生物的分离.ppt
D 4、纤维素分解菌的选择培养基有选择作用,原因在于其含有 ( ) A.NaNO3 B.KCl C.酵母膏 D.纤维素粉 * 纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,是含量最丰富的多糖类物质。 (一)纤维素与纤维素酶 阅读课本P27“纤维素与纤维素酶”内容,思考以下问题。 1.纤维素是高分子有机物,组成的化学元素是什么?组成它的单体是什么? 2.自然界中,哪些材料富含纤维素? 3.纤维素酶的组分是什么?分别具有哪些作用? 1.纤维素化学组成:_________三种元素,是一种多糖,其单体是______。 2.纤维素的分布:_____是自然界中纤维素含量最高的天然产物,此外,木材、作物秸秆等也富含纤维素。 3.纤维素酶作用:纤维素酶是一种_____,一般认为它至少包括三种的组分,即___酶、___酶和葡萄糖苷酶,前两种使_____分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成_____。 C、H、O 葡萄糖 棉花 复合酶 CX C1 纤维素 葡萄糖 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 C1酶 CX酶 葡萄糖 苷酶 ①取二支20mL的试管 实验:纤维素酶分解纤维素的实验 ②各加入一张滤纸条 ③各加入pH4.8,物质量为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液11ml和10ml 甲 乙 ④在乙试管中加入1mL纤维素酶 ⑤两支试管固定在锥形瓶中,放在 140r/min的摇床上振荡1h ⑥结果:乙试管的滤纸条分解了。 讨论:乙试管的滤纸条为什么会分解?甲试管的作用是什么? 提示: 本实验的自变量是纤维素酶的有无,自变量的操作方法是:在一支试管中添加适量(1mL)的纤维素酶溶液,在另一支试管不添加纤维素酶,但需加入等量的缓冲液,不能加入蒸馏水,否则会影响溶液的pH。 (二)纤维素分解菌的筛选 阅读课本P28“纤维素分解菌的筛选”内容,思考以下问题。 1.筛选的方法: 2.筛选的原理: 刚果红能与纤维素形成___________,而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中就会出现以________________________。这样我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌 ________染色法 刚果红 红色复合物 纤维素分解菌为中心的透明圈 练一练: 1.下列关于纤维素酶的说法,错误的是 A. 纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种 B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖 2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是 A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈,则说明已筛 选出了纤维素分解菌 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 一、土壤取样 取样的环境是怎样的,作出这种选择的理由是什么? 原因:生物与环境的互相依存关系。 答:纤维素分解菌大多分布在____________的环境中。因此,选择纤维素丰富的环境,如树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等等。 富含纤维素 二、选择培养 参照右图配置,回答下列问题 1.纤维素分解菌选择培养基属于______(固体、液体)培养基,原因是________________。 液体 没有添加凝固剂 2.该培养基对微生物________(具有,不具有)选择作用。如果具有,又是如何选择的?____________________________________________________________。 以纤维素粉为唯一碳源,能分解纤维 素的微生物可以大量繁殖 具有 将__________改为_________。 3.你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用? 葡萄糖 纤维素粉 4.实验流程中“选择培养” 的目的是什么? 增加纤维素分解菌的浓度。 思考:为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物? 在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用。 选择培养的操作方法: 将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下震荡培养1~2天,直至培养液变浑浊。吸取一定的培养液(如5ML),转移至另一瓶新鲜的选择培养基中,以同样的方法培养到培养液变混浊。吸取适量的培养液,稀
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