、菊花的组织培养经典.ppt

指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。 植物组织培养原理： 1、概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。 2、原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质都有发育成为完整个体所必需的全部基因 二、影响植物组织培养的因素： 3、不同植物激素使用顺序 4、不同植物激素使用量 结果分析与评价 （一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格 课题延伸（略） 练习 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。 4、接种注意事项 ①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种 ②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件 ③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分 思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 （四）培养 1、愈伤组织的培养 从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长的更快。 在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为绿色 2、试管苗的培养 当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗的见光培养 （五）移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日 1、打开封口膜 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间 （六）栽培 3、移栽 珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培 幼苗长壮后，移栽到土壤中 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花 三、课题延伸 1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养 2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ * 萧县郝集中学 * * 菊花的组织培养 又称：植物离体培养 一、植物组织培养的概念 离体组织 完整植株 人工控制条件 离体组织 完整植株 人工控制条件 1、离体 2、无菌 3、营养物质： 4、激素： 5、其他外界条件： 大量元素 微量元素 有机物 生长素 细胞分裂素 pH值 温度 光照 植物细胞的全能性 植物全能性 的表达 离体的植物器官、组织、细胞 胚状体 根、芽 愈伤组织 人工种子 再生植株 脱分化 高度分化的动物细胞，全能性受到限制。 但细胞核仍然保持着全能性 已分化的植物细胞，仍具有全能性 3、实例 受精卵胚胎干细胞其他干细胞体细胞 4、全能性的比较: 细胞的分化 ①概念： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 ②过程： 如：受精卵增殖、分化 形成组织、器官、系统 ④实质： 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果 ③结果： 形成不同的细胞和组织 ⑤特点： （2）稳定性： （3）全能性： （1）持久性： 是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度 细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的 已分化的细胞，仍具有发育的潜能 3、植物组织培养过程: 离体组织或细胞 植物体 脱分化 细胞分裂素≈生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素生长素 细胞分裂素生长素 再分化 不需要光 需要光 愈伤组织 愈伤组织:细胞排列疏松而无规则, 是高度液泡化的、 成无定形状态 的 薄壁细胞 来源： 由离体组织、细胞 脱分