《月季的花药培养》课件新人教版选修.ppt

基础知识： （一）、被子植物的花粉发育 （二）、产生花粉植株的两条途径 （三）、影响花药培养的因素 人工种子 又称人造种子、合成种子或无性种子，就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体，包裹在能提供营养的胶囊（人造胚乳）里，再在外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜（人造种皮），造成一种类似种子的结构，能在一定的条件下萌发生长，形成完整植株。 * * * * 第一节月季的花药培养 一、课题目标： 说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径，说出影响花药培养的因素，学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。 二、课题重点和难点： 选取适宜的培养材料和培养基。 三、技能目标： 知道被子植物花粉发育的过程；说出产生花粉植株的两种途径；记住影响花药培养的因素，尝试花药培养的实验操作过程，并进行无菌操作；知道花药培养在育种上的意义。 一、被子植物的花粉发育 花丝 花药 一、被子植物的花粉发育 一、被子植物的花粉发育 小孢子母细胞 4个小孢子 四分体时期 4个小孢子 单核居中期 4个小孢子 单核靠边期 花粉粒 双核期 二、产生花粉植株的两种途径 二、产生花粉植株的两种途径 花药 胚状体 愈伤组织 丛芽 移栽 丛芽 生根 注意： ①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。 ③两个精子和一个营养核的基因型相同。 ④ 1花粉母细胞 4个小孢子 减分 有分 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有分 8个精子 （二）产生花粉植株的两种途径 ① ② 移栽 花药中的花粉 胚状体 脱分化 愈伤组织 花药中的花粉 脱分化 分化 丛芽 再分化 丛芽 诱导 生根 花粉胚形成的小植株 三、影响花药培养的因素 (1)材料的选择 ①不同种类植物的诱导成功率不同。 ②同一种植物，亲本植株的生理状况对诱导成功率有直接影响。 ③合适的花粉发育时期：花期早期时的花药最佳。 ④最合适的选择时期：单核居中期或单核靠边期。 a．不选择单核期以前花药的原因：质地幼嫩，极易破碎。 b．不选择单核期以后花药的原因：花瓣已有些松动，给材料的消毒带来困难。 实验操作 一、材料的选取 1、醋酸洋红法 ①醋酸洋红的配置 将体积分数45％的醋酸100ml煮沸，缓缓加入1g洋红，在加热回流8h，冷却至50℃，过滤即可。 ②染色操作 将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1％的醋酸洋红，用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显微镜下检查。 实验操作 一、材料的选取 2、焙花青—铬钒法 ①卡诺氏固定液的配制方法 将无水酒精与冰醋酸按体积比为3：1的比例混匀 ②焙花青—铬钒溶液的配制方法 将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸馏水中，溶解后加入0.1g焙花青，混匀并加热至沸腾，煮沸5分钟后冷却至室温，过滤，加蒸馏水定容至100ml ③染色操作 花药应该在卡诺氏固定液中固定20min，然后取出放在载玻片上，加焙花青—铬钒溶液染色，盖上盖玻片后在显微镜下检查。这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 1、酒精处理 ①花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒，立即取出。 ②无菌水清洗 ③无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 二、材料的消毒 2、消毒液处理 ① 放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） ② 无菌水冲洗3~5次 用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。 二、材料的消毒 在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药 ②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成 立即将花药接种于培养基上，通常每瓶接种花药7-10个。 1、剥取花药 ①勿损伤花药，以免诱导出非花粉愈伤组织 2、接种 注意： 三、接种和培养 ①培养条件：温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。 3、培养 ②培养：一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体 长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株 ③注意：如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。 在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化（主要原因是营养核和生殖核融合造成的） 4、鉴定和筛选 *